Anticorps polyclonal de lapin anti-RPA70/RPA1 pour WB, IHC-P, ELISA - P27694

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RPA70/RPA1

• La sous-unité de 70 kDa de la protéine A de réplication se liant à l’ADN (RPA70) est la plus grande sous-unité du complexe RPA hétérotrimérique, qui se lie aux intermédiaires d’ADN simple brin formés lors de la réplication et de la réparation de l’ADN et les stabilise, empêchant leur réappariement et coordonnant le recrutement des protéines (PubMed:17596542, PubMed:27723717, PubMed:27723720). Références associées : PMID:17596542, PMID:27723717, PMID:27723720
• Essentiel à la réplication de l’ADN et à la réponse cellulaire aux dommages de l’ADN, le complexe RPA orchestre la réparation de l’ADN et l’activation des points de contrôle (PubMed:9430682). Références associées : PMID:9430682
• RPA recrute et active la kinase ATR via ATRIP, ce qui la positionne comme un régulateur majeur de la réponse aux dommages de l’ADN (PubMed:24332808). Références associées : PMID:24332808
• Elle facilite le recrutement de RAD51 et RAD52 sur la chromatine au niveau des cassures double brin de l’ADN, favorisant ainsi la réparation par recombinaison homologue (PubMed:17765923). Références associées : PMID:17765923
• RPA70 interagit directement avec les facteurs de réparation par excision de nucléotides XPA et XPG et est nécessaire à cette voie de réparation (PubMed:7697716). Références associées : PMID:7697716
• En outre, RPA70 participe à la réparation par excision de bases via son interaction avec UNG (PubMed:9765279), contribue au maintien des télomères (PubMed:17959650, PubMed:34767620) et, en tant que composant du complexe alternatif aRPA, peut soutenir la réparation de l’ADN, mais pas la réplication de l’ADN chromosomique (PubMed:19996105). Références associées : PMID:9765279, PMID:17959650, PMID:34767620, PMID:19996105
• Au niveau subcellulaire, RPA70 se localise dans le noyau et les corps de PML, ce qui concorde avec ses fonctions dans le métabolisme de l’ADN.
• De nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l’acétylation, l’ADP-ribosylation et l’ubiquitination, régulent son activité ; la protéine contient des domaines à doigt de zinc essentiels à la liaison à l’ADN.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 1–240 de l’extrémité N-terminale de RPA70 humain. Pour le Western blot, prévoir une bande spécifique d’environ 68 kDa dans les lysats de cellules humaines ; il est recommandé d’utiliser des extraits nucléaires afin d’enrichir le signal.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P), une récupération antigénique peut être nécessaire ; un marquage nucléaire est attendu. Valider les profils de coloration dans des tissus témoins positifs et négatifs appropriés.
• Cet anticorps polyclonal convient à l’ELISA ; il est recommandé d’optimiser la concentration de revêtement et les conditions de blocage.
• RPA70 étant très conservée, une réactivité croisée avec d’autres espèces (par ex. la souris ou le rat) est possible, mais non garantie ; vérifier la réactivité dans l’espèce prévue en cas d’utilisation au-delà de l’humain.

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