Anticorps polyclonal Anti-ROCK2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75116

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de ROCK2

• La protéine kinase 2 associée à Rho (ROCK2), également connue sous le nom de ROCK-II ou p164 ROCK-2, est une sérine/thréonine protéine kinase codée par le gène ROCK2.
• Elle agit comme un régulateur clé du cytosquelette d'actine et de la polarité cellulaire, médiant la contraction du muscle lisse, la formation de fibres de stress, la dynamique des adhésions focales, la rétraction des neurites et la motilité cellulaire par phosphorylation de multiples substrats, notamment ADD1, CNN1, EZR, MYL9/MLC2 et VIM.
• ROCK2 phosphorylate et active MAPK1/3 et RPS6KA1 lors de la différenciation myogénique, et agit comme un régulateur négatif de l'activation des cellules endothéliales angiogéniques induite par VEGF.
• Elle joue un rôle important dans la duplication du centrosome et contribue à la génération de rythmes circadiens dans la contractilité vasculaire en modulant la phosphorylation de la chaîne légère de la myosine.
• Au niveau subcellulaire, ROCK2 se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, le noyau, le cytosquelette et le centrosome.
• Au niveau des protéines, ROCK2 est spécifiquement exprimée dans le cerveau, et ses caractéristiques structurelles comprennent des domaines en hélice alpha (coiled-coil), à doigt de zinc et kinase (liaison ATP, liaison au magnésium et aux métaux).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé correspond à la région C-terminale (aa 1109–1388) de ROCK2 humain, qui comprend les domaines homologie à la pleckstrine et riche en cystéine. Cette conception est censée générer des anticorps reconnaissant des épitopes dans la moitié C-terminale de la protéine.
• Pour le Western blotting, une bande d'environ 160–161 kDa est attendue dans les lysats de tissus/cellules humains, de souris ou de rats. Incluez des témoins positifs appropriés tels que le lysat cérébral (tissu connu pour l'expression) et validez la bande spécifique en utilisant un siRNA de knockdown ou un peptide compétitif si nécessaire.
• En immunohistochimie (IHC‑P) et immunofluorescence (IF/ICC), considérez que ROCK2 présente une large distribution subcellulaire (cytoplasme, membrane, noyau et centrosome) ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation et incluez des témoins d'isotype.
• L'anticorps convient également pour ELISA ; associez-le à un système de capture/détection validé pour votre matrice. Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la variation d'un lot à l'autre doit être évaluée en cas de changement de lot.

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