Anticorps polyclonal de lapin anti-ROCK1 pour WB, IP, IF, ELISA - Q13464

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de ROCK1

• ROCK1 est une sérine/thréonine-protéine kinase et un membre de la famille des protéines kinases associées à Rho contenant une région en superhélice. Elle est également connue sous les noms de ROCK-I ou p160ROCK et a été identifiée comme un antigène de carcinome rénal, NY-REN-35.
• ROCK1 est un régulateur clé du cytosquelette d’actine et de la polarité cellulaire. Elle contrôle la contraction des muscles lisses, l’organisation de l’actine, la formation des fibres de stress et des adhérences focales, la rétraction des neurites, ainsi que l’adhésion et la motilité cellulaires par phosphorylation de substrats tels que DAPK3, GFAP, LIMK1/2, MYL9/MLC2, PFN1 et PPP1R12A. Références associées : PMID:10436159, PMID:10652353, PMID:11018042
• ROCK1 phosphoryle FHOD1 et favorise de manière synergique le blebbing non apoptotique de la membrane plasmique dépendant de SRC. Références associées : PMID:18694941
• Lors d’un stress induit par les UVB, ROCK1 phosphoryle JIP3 et régule le recrutement de JNK vers JIP3. Références associées : PMID:19036714
• Agit comme un régulateur négatif de l’activation des cellules endothéliales angiogéniques induite par le VEGF. Références associées : PMID:19181962
• Favorise la différenciation terminale des kératinocytes. Références associées : PMID:19997641
• Joue un rôle dans la différenciation érythroïde terminale. Références associées : PMID:21072057
• ROCK1 se localise dans le cytoplasme, le cytosquelette, le centrosome, le centriole, la membrane de l’appareil de Golgi et la membrane cellulaire. Elle est également présente au niveau des projections cellulaires, notamment les blebs, les lamellipodes et les ondulations membranaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 400–660 dans la moitié N-terminale de ROCK1, ce qui peut permettre la reconnaissance de la protéine entière et potentiellement de certaines isoformes. Vérifiez la réactivité dans le système d’échantillons concerné.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d’environ 158 kDa. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, 6–8 % SDS-PAGE) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l’immunoprécipitation (IP), ajustez la quantité d’anticorps par titrage et sélectionnez un tampon de liaison/lavage approprié afin de maximiser l’efficacité de capture.
• Pour l’immunofluorescence sur des coupes incluses en paraffine (IF-P), envisagez une récupération antigénique induite par la chaleur et incluez des tissus témoins positifs et négatifs.
• Pour l’ELISA, testez la protéine ROCK1 recombinante ou des lysats natifs afin de déterminer les conditions optimales de revêtement et de détection. Validez avec des échantillons positifs/négatifs connus.

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