Anticorps Monoclonal Lapin Anti-ROCK1 pour WB, ELISA - Q13464

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de ROCK1

• ROCK1 est une sérine/thréonine-protéine kinase qui agit comme un régulateur principal du cytosquelette d'actine, pilotant des processus essentiels tels que la polarité cellulaire, la contraction du muscle lisse, la formation de fibres de stress et d'adhésions focales, la rétraction des neurites, l'adhésion cellulaire et la motilité. Ces effets sont médiés par la phosphorylation de divers substrats, notamment DAPK3, GFAP, LIMK1, LIMK2, MYL9/MLC2, TPPP, PFN1 et PPP1R12A (PubMed:10436159, PubMed:10652353, PubMed:11018042). Références associées : PMID:10436159 PMID:10652353 PMID:11018042

• La phosphorylation de FHOD1 par ROCK1 favorise de manière synergique le bourgelement non apoptotique de la membrane plasmique dépendant de SRC (PubMed:18694941). Références associées : PMID:18694941

• Sous stress UVB, ROCK1 phosphoryle JIP3 et module le recrutement consécutif de JNK, contrôlant ainsi la signalisation de stress en aval (PubMed:19036714). Références associées : PMID:19036714

• ROCK1 régule négativement l'activation des cellules endothéliales angiogéniques induite par VEGF, limitant ainsi l'angiogenèse excessive (PubMed:19181962). Références associées : PMID:19181962

• ROCK1 est impliqué dans les processus de différenciation terminale, contribuant à la différenciation érythroïde (PubMed:21072057) et favorisant la différenciation terminale des kératinocytes (PubMed:19997641). Références associées : PMID:21072057 PMID:19997641

• Au niveau subcellulaire, ROCK1 est largement distribué dans le cytoplasme, le cytosquelette (centrosome/centriole), la membrane de l'appareil de Golgi, la membrane cellulaire et les projections cellulaires dynamiques, y compris les bourgelets (blebs), les lamellipodes et les replis (ruffles). Il est détecté dans les plaquettes sanguines.

• Structurellement, ROCK1 contient un domaine kinase, une région en hélice superhélicoïdale (coiled-coil) et des motifs à doigt de zinc, et son activité est modulée par la phosphorylation et l'acétylation.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• Pour le western blotting, notez que la ROCK1 de pleine longueur a un poids moléculaire prédit d'environ 158 kDa. Sélectionnez le pourcentage approprié de gel de polyacrylamide (par exemple, 6–8 %) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de poids moléculaire élevé. Il est conseillé de valider la spécificité de la bande à l'aide de tests de compétition peptidique ou d'un knockdown par ARNsi.
• Cet anticorps est confirmé pour sa réactivité avec des échantillons humains, de souris et de rat ; lors de l'utilisation de lysats d'autres espèces, la réactivité croisée doit être vérifiée expérimentalement.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé de coupler l'anticorps avec un anticorps de détection apparié et d'établir la linéarité et la sensibilité de l'essai standard avec la protéine ROCK1 recombinante ou des échantillons biologiques pertinents.
• Compte tenu de la conception de l'immunogène (un peptide situé dans les résidus 1100–1200), considérez que l'épitope se situe dans la région C-terminale ; les conditions dénaturantes ou la protéolyse partielle peuvent affecter l'efficacité de détection.

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