Anticorps monoclonal de lapin anti-RNF40 pour WB, IHC-P, ELISA - O75150

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RNF40/BRE1B

• RNF40 code pour l'E3 ubiquitine-protéine ligase BRE1B, également connue sous le nom de protéine associée à la rétinoblastome de 95 kDa (RBP95) et de protéine à doigt RING 40. C'est un membre de la famille des transférases E3 ubiquitine de type RING, caractérisé par un domaine à doigt RING qui médie la liaison du zinc et l'activité ubiquitine ligase.
• BRE1B forme un complexe fonctionnel avec RNF20 pour catalyser la mono-ubiquitination de l'histone H2B sur la lysine 120 (H2BK120ub1). Cette modification sert de marque épigénétique spécifique pour l'activation transcriptionnelle et est essentielle pour la méthylation ultérieure de l'histone H3 sur les lysines 4 et 79 (H3K4me et H3K79me).
• Grâce à son rôle dans l'ubiquitination de H2B, le complexe RNF20/40 est central dans le code histone et la régulation génique. Il est requis pour l'activation transcriptionnelle des gènes Hox et probablement de nombreux autres locus liés au développement et à la prolifération.
• BRE1B est localisée principalement dans le noyau, ce qui correspond à sa fonction dans la modification de la chromatine et le contrôle transcriptionnel.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec des niveaux plus élevés observés dans les testicules, le cœur et le pancréas, et des niveaux plus faibles dans les poumons, les muscles squelettiques et l'intestin grêle.
• Les modifications post-traductionnelles de BRE1B incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité, sa stabilité ou ses interactions protéiques. Plusieurs isoformes sont produites par épissage alternatif.
• Dans le contexte des infections microbiennes, il a été démontré que BRE1B favorise le cycle lytique de l'herpèsvirus humain 8 (KSHV) en induisant l'expression de gènes viraux lytiques, y compris le gène maître de commutation de latence RTA/ORF50.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à une région située entre les résidus 231-431 du RNF40 humain, donc l'anticorps peut reconnaître la forme pleine longueur et certaines variantes d'isoformes. Validez la spécificité dans votre système modèle.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 114 kDa ; utilisez des contrôles de charge appropriés et vérifiez l'identité des bandes avec les lysats pertinents.
• En IHC-P, optimisez les conditions de démasquage antigénique et attendez-vous à une coloration nucléaire correspondant à la localisation subcellulaire de la protéine.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser une protéine RNF40 recombinante comme standard pour quantifier la liaison de l'anticorps et la performance du test.
• La réactivité croisée est confirmée pour l'humain et la souris ; pour d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène avant une utilisation expérimentale.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, il offre une haute affinité et une reproductibilité d'un lot à l'autre, le rendant adapté pour des résultats robustes et cohérents dans les applications de recherche et de diagnostic.

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