Anticorps polyclonal de lapin anti-RNF4 pour WB, ELISA - P78317

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RNF4

• RNF4 (SLX5, SNURF) est une ligase E3 ubiquitine-protéine qui se lie spécifiquement aux chaînes polysumoylées et assure la polyubiquitination (liaisons Lys-6, Lys-11, Lys-48, Lys-63), ciblant les substrats pour leur dégradation par le protéasome.
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• Elle régule la dégradation de protéines cellulaires importantes, notamment PML, l'activateur transcriptionnel PEA3 et PARP1 sumoylée, jouant ainsi un rôle à la fois dans le contrôle transcriptionnel et dans la réponse aux dommages de l'ADN.
  Références associées : PMID:18408734, PMID:19307308, PMID:20943951, PMID:35013556

• RNF4 est essentielle à l'alignement des chromosomes et à l'assemblage du fuseau au cours de la mitose en ciblant CENPI polysumoylée dans le complexe kinétochorien CENPH-CENPI-CENPK pour sa dégradation.
  Références associées : PMID:20212317

• Elle module les réponses cellulaires à l'hypoxie et au choc thermique en assurant respectivement la dégradation d'EPAS1/HIF-2α et de PARP1.
  Références associées : PMID:19779455, PMID:20026589

• Par ailleurs, RNF4 peut se lier à l'ADN/aux nucléosomes et renforcer la transcription basale ainsi que celle médiée par les récepteurs stéroïdiens, ce qui indique une fonction directe de régulation transcriptionnelle.
  Références associées : PMID:12885770

• La protéine contient un domaine en doigt de zinc RING et plusieurs motifs en doigts de zinc, ce qui est cohérent avec ses activités de liaison à l'ADN et de ligase E3 (mots-clés : liaison à l'ADN, liaison aux métaux, zinc, doigt de zinc).

• Au niveau subcellulaire, RNF4 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les corps nucléaires PML, reflétant son implication dans des processus nucléaires et cytoplasmiques.

• Elle est largement exprimée à de faibles niveaux dans de nombreux tissus, avec une forte expression dans les testicules, ce qui suggère un rôle spécialisé dans le développement des cellules germinales.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 1 à 190 de RNF4 humain, couvrant la région N-terminale qui inclut plusieurs motifs en doigts de zinc et le domaine RING. Cette conception peut produire des anticorps capables de reconnaître à la fois la protéine complète et les fragments N-terminaux.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 21 kDa est attendue pour RNF4 non modifiée. En raison de modifications post-traductionnelles importantes (sumoylation, ubiquitination), des bandes supplémentaires peuvent être observées. Valider dans des échantillons présentant une forte expression endogène de RNF4, tels que les tissus testiculaires.
• Pour les applications ELISA, envisager un revêtement avec l'immunogène recombinant ou des substrats sumoylés afin de démontrer la spécificité ; les conditions de l'ELISA indirect doivent être déterminées empiriquement.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée ; vérifier l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène, car la séquence N-terminale est très conservée chez ces espèces.

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