Anticorps polyclonal de lapin anti-RNF34 pour WB, IF/ICC et ELISA - Q969K3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RNF34

• RNF34 est une ligase E3 d'ubiquitine protéique qui catalyse la dégradation protéasomique médiée par l'ubiquitine des protéines cibles, notamment CASP8 et CASP10, régulant ainsi négativement l'apoptose extrinsèque. Références associées : PMID:15069192
• Il ubiquitine directement p53/TP53, le ciblant pour la dégradation par le protéasome et régulant ainsi négativement les fonctions cellulaires dépendantes de p53. Références associées : PMID:17121812
• RNF34 régule indirectement p53/TP53 en médiant l'ubiquitination et la dégradation de SFN (14-3-3 sigma), un stabilisateur de p53. Références associées : PMID:18382127
• Il médie la dégradation protéasomique de PPARGC1A (PGC-1α), influençant le métabolisme des cellules adipeuses brunes et l'homéostasie énergétique. Références associées : PMID:22064484
• Par le biais de la polyubiquitination liée à la Lys-48 de NOD1, RNF34 favorise sa dégradation protéasomique, suggérant un rôle dans la régulation de l'immunité innée. Références associées : PMID:25012219
• La protéine est localisée à la membrane cellulaire, au système endomembranaire, au noyau (y compris les speckles nucléaires) et au cytosol.
• RNF34 est exprimé de manière ubiquitaire dans des tissus tels que le cœur, le cerveau, le foie, le muscle squelettique, le rein, le pancréas, la rate, le thymus, la prostate, les testicules, l'ovaire, le côlon et les leucocytes.
• Les caractéristiques structurelles incluent un doigt de zinc de type RING ; la protéine est sujette à l'épissage alternatif et à la phosphorylation, ce qui est cohérent avec son rôle dans les voies de l'apoptose et de l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-220 de la partie N-terminale du RNF34 humain. Cette région peut être suffisante pour détecter le RNF34 de pleine longueur ; cependant, le RNF34 endogène pourrait présenter plusieurs isoformes dues à l'épissage alternatif. Envisagez de valider la spécificité de l'anticorps dans vos lignées cellulaires cibles à l'aide de témoins appropriés.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit du RNF34 est d'environ 42 kDa. Une bande proche de cette taille peut être attendue, mais des modifications post-traductionnelles ou une variabilité des isoformes peuvent entraîner de légers décalages. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps pour vos échantillons.
• En immunofluorescence (IF/ICC), il a été rapporté que RNF34 se localise dans le noyau (y compris les speckles nucléaires), le cytosol et la membrane cellulaire. Les conditions de fixation et de perméabilisation appropriées doivent être testées pour préserver l'antigénicité et obtenir une coloration spécifique.
• Pour l'ELISA, la nature polyclonale de l'anticorps peut fournir une sensibilité élevée pour la détection du RNF34 dans des échantillons humains. Incluez des courbes standard et des témoins négatifs pour assurer la linéarité et la spécificité du test.
• Cet anticorps a été validé pour la réactivité croisée avec l'humain. Si vous l'utilisez pour d'autres espèces, une analyse d'homologie de séquence et des tests empiriques sont recommandés.

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