Anticorps Polyclonal Anti-RNF168 pour WB, ELISA - Q8IYW5

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RNF168

• Ligase E3 ubiquitine-protéique qui catalyse la mono-ubiquitination de l'histone nucléosomique H2A aux Lys-13 et Lys-15 (H2AK13Ub et H2AK15Ub), jouant un rôle central dans la réponse aux dommages à l'ADN.
• Agit avec UBE2N/UBC13 en aval de RNF8 pour amplifier l'ubiquitination des histones H2A et H2AX au niveau des cassures double-brin, favorisant la formation de chaînes d'ubiquitine liées par « Lys-63 » et le recrutement des protéines de réparation TP53BP1 et BRCA1.
• Également recruté sur les sites de ponts inter-brins (ICL) de l'ADN, où il médie l'ubiquitination liée par « Lys-63 » des histones H2A et H2AX, facilitant l'assemblage du complexe de l'anémie de Fanconi (FA) et la réparation.
• Suite à des dommages à l'ADN, collabore avec RNF8 pour ubiquitiner et dégrader JMJD2A/KDM4A, démasquant la marque H4K20me2 pour promouvoir le chargement de TP53BP1 sur les sites de dommages.
• Impliqué dans la commutation de classe (class switch recombination) dans le système immunitaire en régulant les voies de réparation des cassures double-brin.
• Localise dans le noyau, où il est recruté sur les lésions de l'ADN par liaison aux histones H2A et H2AX préalablement ubiquitinées.
• Appartient à la famille des protéines à doigt RING ; contient un domaine RING N-terminal et des motifs MIU C-terminaux qui médient la liaison à l'ubiquitine.
• Classé comme régulateur de la chromatine et facteur de réparation de l'ADN ; les mots-clés biologiques clés incluent liaison de métal, phosphoprotéine, transférase et voie de conjugaison Ubl.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 300–571 du RNF168 humain, une région englobant les motifs MIU C-terminaux ; cette conception peut favoriser la détection de la protéine pleine longueur à environ 65kDa.
• Pour le Western blotting, envisagez de tester des extraits nucléaires de lignées cellulaires humaines ou de souris, car RNF168 se localise dans le noyau et son expression peut être induite dans des conditions d'endommagement de l'ADN.
• L'ELISA peut être utilisé pour cribler des surnageants d'hybridomes ou quantifier les niveaux de RNF168 ; assurez-vous d'utiliser l'immunogène recombinant ou un peptide pertinent comme antigène de revêtement.
• Puisque RNF168 fonctionne dans la signalisation dépendante de l'ubiquitine, incluez des inhibiteurs appropriés de protéases et de déubiquitinases lors de la préparation des échantillons pour préserver les espèces potentiellement ubiquitinées.
• Validez la spécificité de l'anticorps et la dilution optimale dans votre propre système expérimental, car les performances peuvent varier en fonction du type d'échantillon et du traitement.

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