Anticorps monoclonal anti-RNF14 pour WB, ELISA - Q9UBS8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RNF14

• Également connue sous le nom de protéine 54 associée au récepteur aux androgènes (ARA54), HFB30 et protéine à doigt RING 14. Plusieurs isoformes existent en raison d'épissages alternatifs.
• Fonctionne comme une ligase E3 d'ubiquitine-protéine dans la voie de contrôle qualité de la traduction RNF14-RNF25, médiant l'ubiquitination liée à la 'Lys-6' des facteurs de traduction (EEF1A1, ETF1) et des protéines ribosomiques sur les ribosomes bloqués (PubMed:36638793, PubMed:37651229, PubMed:37951215). Références associées : PMID:36638793, PMID:37651229, PMID:37951215
• Nécessaire pour résoudre les liaisons croisées ARN-protéine causées par les aldéhydes réactifs, favorisant la dégradation des produits liés de manière covalente via la voie VCP/protéasome (PubMed:37951215, PubMed:37951216). Références associées : PMID:37951215, PMID:37951216
• Agit comme un régulateur transcriptionnel dans la signalisation Wnt via l'interaction avec les facteurs de transcription TCF TCF7/TCF1, TCF7L1/TCF3 et TCF7L2/TCF4 (PubMed:23449499). Références associées : PMID:23449499
• Peut fonctionner comme un coactivateur pour la transcription dépendante des androgènes et de la progestérone (PubMed:19345326). Références associées : PMID:19345326
• La localisation subcellulaire inclut à la fois le cytoplasme et le noyau.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans divers tissus.
• Contient des domaines à doigt de zinc et est sujette à la phosphorylation ; classée parmi les transférases, la voie de conjugaison Ubl et les protéines liant les métaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région interne (aa 300–400) de la protéine RNF14 humaine ; cela peut favoriser la reconnaissance d'épitopes linéaires dénaturés, rendant l'anticorps bien adapté pour le Western blot (WB) dans des conditions réductrices/dénaturantes.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser le peptide immunisant comme antigène de revêtement positif et validez les performances de l'anticorps avec la protéine recombinante pleine longueur ou des lysats cellulaires d'origine humaine, murine ou de rat pour confirmer la réactivité croisée.
• Étant donné que RNF14 est exprimée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, assurez une fractionnement approprié ou une préparation de lysat total pour détecter la cible en WB.
• Vérifiez la spécificité de l'anticorps en le testant sur des lignées cellulaires surexprimant ou ayant subi une extinction de RNF14, si disponibles.
• Utilisez des contrôles de charge appropriés (~54 kDa) et confirmez que la taille de la bande observée correspond au poids moléculaire prédit de RNF14.

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