Anticorps polyclonal de lapin anti-ARNSE3 pour WB, ELISA - P12724

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ARNSE3

• L'ARNSE3 (également appelé protéine cationique des éosinophiles, ECP) est une protéine sécrétée qui agit comme cytotoxine et helminthotoxine, avec une activité ribonucléase de faible efficacité.
• Il perturbe les membranes bactériennes, entraînant une dépolarisation de la membrane cytoplasmique, un détachement de la membrane externe et une perte du contenu cellulaire chez les bactéries Gram négatives et Gram positives.
• L'ARNSE3 est libéré par les éosinophiles activés et contribue à la défense de l'hôte contre les helminthes parasites et les infections bactériennes.
• La protéine contient plusieurs liaisons disulfure typiques de la superfamille des RNase A et subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la nitration de la tyrosine.
• Au niveau sous-cellulaire, l'ARNSE3 est traité par la voie de sécrétion et se trouve dans les granules des éosinophiles et les fluides extracellulaires.
• Son activité ribonucléase, bien que faible, peut contribuer à l'activité antivirale et à la dégradation de l'ARN dans le milieu inflammatoire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond aux résidus 100–160 de l'ARNSE3 humain ; cette région présente une homologie élevée avec l'ARNSE3 du rat, ce qui correspond à la réactivité croisée observée. Vérifiez la réactivité chez d'autres espèces par alignement de séquences.
• Pour le Western blot, attendez une bande principale d'environ 18 kDa ; des bandes supplémentaires dues à la glycosylation ou à l'agrégation peuvent être observées. Utilisez des conditions réductrices et validez avec des contrôles appropriés.
• En ELISA, utilisez l'ARNSE3 recombinant ou la protéine native issue de lysats d'éosinophiles comme antigène de revêtement. Optimisez le tampon de revêtement et le blocage pour minimiser le bruit de fond.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; pensez à valider chaque nouveau lot dans votre dispositif d'essai spécifique pour obtenir des performances constantes.
• L'ARNSE3 peut être détecté dans le sérum, le plasma ou les surnageants de culture cellulaire. Incluez des contrôles positifs et négatifs (par exemple, lysats d'éosinophiles vs. lysats de neutrophiles) pour confirmer la spécificité.

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