Anticorps monoclonal anti-RIPK3 (RIP3) pour WB, IHC-P, ELISA - Q9Y572

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RIPK3 (Receptor-interacting serine/threonine-protein kinase 3)

• La sérine/thréonine-protéine kinase 3 interagissant avec les récepteurs (RIPK3), également appelée RIP3, est un médiateur clé de la nécrose programmée (nécroptose) et de l'apoptose, intervenant en aval des récepteurs de mort et des capteurs de pathogènes. Références associées : PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:22265413
• Lors de son activation par la signalisation de ZBP1 ou du récepteur du TNF, RIPK3 forme un complexe inducteur de nécrose et phosphoryle MLKL, déclenchant sa translocation vers la membrane plasmique, un influx calcique et la rupture membranaire. Références associées : PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:22265413
• RIPK3 régule également l'apoptose par une voie dépendante de RIPK1, FADD et CASP8, indépendante de MLKL et de sa propre activité kinase.
• La protéine se trouve dans le cytosol et peut se translocaliser vers le noyau, où elle médie la nécroptose en réponse à une infection virale en perturbant l'enveloppe nucléaire.
• RIPK3 se lie aux enzymes métaboliques GLUL, GLUD1 et PYGL et améliore leur activité, stimulant potentiellement le cycle de Krebs (TCA) et la phosphorylation oxydative pour augmenter la production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS). Références associées : PMID:19498109
• Elle est fortement exprimée dans le pancréas, avec une expression plus faible dans le cœur, le placenta, les poumons et les reins ; son expression est significativement augmentée dans les cancers du côlon et du poumon.
• Lors d'une infection par le virus de l'herpès simplex de type 1, RIPK3 forme des structures amyloïdes hétéromériques avec la protéine virale ICP6, inhibant la nécroptose et facilitant l'échappement immunitaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (auto-phosphorylation et trans-phosphorylation avec RIPK1), la formation de liaison isopeptidique et la conjugaison à des protéines de type ubiquitine.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 101 à 200 de la RIPK3 humaine (NP_006862.2). Cette région est conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 57 kDa ; cependant, des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison de modifications post-traductionnelles (par exemple, la phosphorylation) ou d'épissage alternatif. Validez la spécificité des bandes à l'aide de contrôles appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de démasquage antigénique peuvent être nécessaires. Les tissus contrôles positifs comprennent le pancréas ou les échantillons de tumeurs coliques et pulmonaires où RIPK3 est fortement exprimée.
• Pour les applications ELISA, confirmez la réactivité avec la protéine cible dans vos conditions de dosage spécifiques ; envisagez d'utiliser la protéine RIPK3 recombinante ou des lysats cellulaires comme étalons.

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