Anticorps monoclonal de lapin anti-RIPK1/RIP (Validé KO) pour WB, IP, ELISA - Q13546

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RIPK1

• RIPK1 (également connue sous le nom de RIP, RIP1, protéine de mort cellulaire RIP) est une sérine-thréonine kinase codée par le gène RIPK1 chez l'homme. L'épissage alternatif produit des isoformes avec des poids moléculaires d'environ 76 et 71 kDa.
• En tant que régulateur clé de la signalisation du facteur de nécrose tumorale (TNF), RIPK1 contrôle les voies de l'apoptose, de la nécroptose et de l'inflammation (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Références associées : PMID:17703191 PMID:24144979 PMID:31827280
• RIPK1 a des fonctions doubles : elle agit comme un échafaudage indépendant de l'activité kinase dans le complexe I de TNF-R1 pour promouvoir l'activation de NF-κB et la survie cellulaire, tandis que son activité kinase est nécessaire pour conduire les complexes pro-mort IIa (apoptose) et IIb (nécroptose) (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Références associées : PMID:11101870 PMID:19524512 PMID:19524513
• Dans la nécroptose, RIPK1 agit comme un inhibiteur de la nécroptose médiée par RIPK3 en facilitant le recrutement et l'activation dépendants de FADD de la caspase‑8, qui clive RIPK1 (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Références associées : PMID:19524512 PMID:19524513 PMID:29440439
• RIPK1 contribue également à l'inflammation en favorisant la production transcriptionnelle de cytokines pro-inflammatoires telles que l'interleukine‑6 (IL6) (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Références associées : PMID:31827280 PMID:31827281
• La kinase phosphoryle des cibles en aval, notamment RIPK3 (PubMed:19524513) et l'activateur de la voie MAP3K5 DAB2IP au niveau de Ser‑728 (PubMed:15310755, PubMed:17389591). Références associées : PMID:19524513 PMID:15310755 PMID:17389591
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, avec une association supplémentaire au niveau de la membrane cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles de RIPK1 incluent la phosphorylation, l'ubiquitination et la glycosylation ; des mutations dans le gène RIPK1 sont liées à des maladies auto-inflammatoires.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (acides aminés 465–671) de la protéine humaine RIPK1 ; cette région se situe en aval du domaine kinase et peut reconnaître les deux isoformes rapportées.
• Pour le Western blot (WB), la protéine RIPK1 endogène migre généralement sous forme d'un doublet autour de 76 et 71 kDa ; en raison des modifications post-traductionnelles et de la formation de complexes, des bandes supplémentaires peuvent apparaître.
• La validation KO confirme la spécificité de l'anticorps ; il est recommandé d'inclure des lysats de cellules knockout pour RIPK1 comme témoin négatif.
• Pour l'immunoprécipitation (IP) et l'ELISA, les concentrations optimales d'anticorps doivent être déterminées empiriquement dans le système expérimental pertinent.

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