Anticorps Monoclonal Anti-RIPK1/RIP pour WB, IP, ELISA - Q13546

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RIPK1

• RIPK1, également connu sous le nom de RIP1 ou protéine de mort cellulaire RIP, est une sérine/thréonine kinase qui agit comme un régulateur critique de l'apoptose médiée par le TNF, de la nécroptose et de la signalisation inflammatoire (PubMed:17703191, PubMed:24144979, PubMed:31827280). Références associées : PMID:17703191, PMID:24144979, PMID:31827280
• Il présente des fonctions dépendantes de l'activité kinase dans la mort cellulaire et des fonctions d'échafaudage indépendantes de la kinase dans la survie cellulaire, y compris l'activation de la voie canonique NF-kappa-B (PubMed:11101870, PubMed:19524512, PubMed:19524513). Références associées : PMID:11101870, PMID:19524512, PMID:19524513
• RIPK1 régule l'assemblage de deux complexes inducteurs de mort : le complexe IIa (RIPK1-FADD-CASP8) pour l'apoptose et le complexe IIb (RIPK1-RIPK3-MLKL) pour la nécroptose.
• Il inhibe la nécroptose dépendante de RIPK3 en recrutant CASP8 via FADD, qui clive RIPK1, limitant ainsi la nécroptose induite par le TNF (PubMed:19524512, PubMed:19524513, PubMed:29440439). Références associées : PMID:19524512, PMID:19524513, PMID:29440439
• RIPK1 est principalement localisé dans le cytoplasme et à la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transduction du signal TNFR1.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation, l'ubiquitination (liaison isopeptidique) et le clivage protéolytique par CASP8, régulant ses fonctions pro-mort et pro-survie.
• Il favorise également la transcription de cytokines pro-inflammatoires telles que l'IL-6, reliant la mort cellulaire aux réponses immunitaires (PubMed:31827280, PubMed:31827281). Références associées : PMID:31827280, PMID:31827281

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 289-490 du RIPK1 humain, une région englobant une partie du domaine kinase ; cette conception peut favoriser la détection de la forme complète et des fragments contenant le domaine kinase.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 76 kDa. Envisagez d'inclure des témoins appropriés pour tenir compte des produits de clivage qui peuvent survenir lors de l'apoptose ou de la nécroptose.
• Dans l'immunoprécipitation, validez les performances de l'anticorps avec des interacteurs connus de RIPK1 tels que TRADD ou FADD dans des conditions de stimulation appropriées (par exemple, traitement au TNF).
• Les expériences ELISA peuvent être optimisées pour la quantification de RIPK1 dans des lysats cellulaires ou des homogénats tissulaires ; la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille RIP doit être évaluée.

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