Anticorps monoclonal anti-Rig-I/DDX58 pour WB, ELISA - O95786

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Rig-I/DDX58

• RIG-I (gène I inductible par l'acide rétinoïque), également appelé DDX58, est une ARN hélicase dépendante de l'ATP appartenant à la famille des récepteurs de type RIG-I (RLR), capteurs de l'immunité innée.
• Il agit comme un récepteur de l'immunité innée cytoplasmique qui détecte les acides nucléiques viraux et déclenche des cascades de signalisation conduisant à la production d'interféron de type I et de cytokines pro-inflammatoires. Références associées : PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:16125763
• Il reconnaît les ARN simple brin et double brin 5'-triphosphorylés, avec une exigence critique d'appariement de bases à extrémité émoussée à l'extrémité 5' ; les petits ARN double brin (<1 kb) sont des ligands efficaces. Références associées : PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:19576794
• Après liaison au ligand, RIG-I s'homo-oligomérise et recrute l'E3 ligase RNF135, conduisant à l'association avec MAVS, à l'activation de TBK1/IKBKE et à la phosphorylation de IRF3/IRF7 pour induire l'expression des gènes antiviraux. Références associées : PMID:15208624, PMID:15708988, PMID:28469175, PMID:31006531
• Il détecte une large gamme de virus à ARN de polarité positive et négative, notamment la grippe, l'hépatite C, la dengue, le virus respiratoire syncytial, ainsi que les rotavirus et les réovirus. Références associées : PMID:21616437, PMID:21884169
• Il médie également les réponses antivirales contre les virus à ADN double brin comme le virus d'Epstein-Barr en reconnaissant les intermédiaires d'ARN double brin transcrits par l'ARN polymérase III. Références associées : PMID:19631370
• Il se localise dans le cytoplasme, le cytosquelette, les projections cellulaires (membranes plissées) et les jonctions serrées ; il est exprimé dans les cellules musculaires lisses vasculaires.
• Il subit des réactions d'acétylation et de phosphorylation ; il possède des domaines doigt de zinc et hélicase ; il participe aux interactions hôte-virus par l'ubiquitinylation et la formation de liaisons isopeptides.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 107 kDa. Il est recommandé d'utiliser des contrôles positifs tels que des lignées cellulaires humaines infectées par un virus (par exemple A549 stimulé au poly(I:C) ou infecté par le virus Sendai) pour vérifier l'induction de RIG-I, car l'expression basale peut être faible dans les cellules non stimulées.
• L'immunogène étant un peptide synthétique, l'anticorps est censé reconnaître un épitope linéaire. Validez la détection de RIG-I endogène dans votre système d'échantillon et optimisez les conditions de blocage et de lavage pour réduire la liaison non spécifique.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Pour les dosages quantitatifs, il est recommandé de l'associer à un anticorps de détection adapté.
• Conservez-le comme recommandé dans un sac de glace dès réception et maintenez-le à -20°C ou -80°C pour un stockage à long terme ; minimisez les cycles de congélation-décongélation.
• Cet anticorps est produit contre le RIG-I humain et validé pour des échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été déterminée et doit être vérifiée si vous l'utilisez sur des modèles non humains.

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