Anticorps polyclonal de lapin anti-RHOH pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15669

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du RHOH

• RHOH (protéine de liaison au GTP liée à Rho, RhoH), également connu sous le nom de TTF (protéine de translocation trois quatre), appartient à la famille des GTPases Rho mais est atypique : il se lie au GTP mais manque d'activité GTPase intrinsèque et est résistant aux RhoGAPs.
• Il fonctionne comme un régulateur négatif critique de la prolifération, de la survie et de la migration des cellules progénitrices hématopoïétiques ; essentiel pour le développement des thymocytes et la signalisation du TCR en médiant le recrutement et l'activation de ZAP70.
• Nécessaire pour la phosphorylation de CD3Z, la translocation membranaire de ZAP70 et l'activation en aval du signalosome LAT lors de la signalisation du pré-TCR et du TCR, assurant une sélection bêta et une sélection positive efficaces.
• Joue un rôle clé dans la fonction des mastocytes en facilitant la phosphorylation SYK dans la transduction du signal médiée par FcεRI et permettant la mobilisation du calcium.
• Inhibe l'activation de NF-κB et CRK/p38 par le TNF, et régule négativement la production de leucotriènes dans les neutrophiles.
• Localisation subcellulaire : principalement cytoplasmique et associée à la membrane cellulaire.
• Spécificité tissulaire : expression restreinte aux cellules hématopoïétiques (la plus élevée dans le thymus, plus faible dans la rate/moelle osseuse) ; enrichie dans les cellules T auxiliaires TH1 ; régulée à la hausse dans les neutrophiles dans des conditions inflammatoires (par exemple, fibrose kystique, colite).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend le RHOH humain全长 (acides aminés 1-191), rendant cet anticorps polyclonal adapté pour la détection de multiples épitopes ; la dilution et les conditions optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque application.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 21 kDa ; utilisez un gel SDS-PAGE à 12–15 % et validez avec des lignées cellulaires hématopoïétiques (par exemple, Jurkat, THP-1) connues pour exprimer le RHOH.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, la perméabilisation est requise pour la coloration cytoplasmique/membranaire ; incluez des contrôles appropriés compte tenu de l'expression hématopoïétique restreinte.
• Une réactivité croisée avec la souris est rapportée ; cet anticorps peut être utilisé dans des modèles murins, mais une validation dans l'espèce et le tissu concernés est recommandée.
• Les applications ELISA peuvent être explorées en utilisant la protéine recombinante comme standard ; envisagez d'optimiser les conditions de revêtement et de détection.

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