Anticorps polyclonal de lapin anti-RheB pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15382

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RheB

• La protéine liant le GTP Rheb (homologue de Ras enrichi dans le cerveau), également connue sous le nom de RHEB2, est une petite GTPase qui agit comme un activateur allostérique du complexe mTORC1 (PubMed:12172553, PubMed:12271141, PubMed:12842888). Références associées : PMID:12172553, PMID:12271141, PMID:12842888
• En réponse aux nutriments, aux facteurs de croissance ou aux acides aminés, Rheb active mTOR en induisant un changement conformationnel qui favorise la phosphorylation des cibles en aval RPS6KB1/S6K1 et EIF4EBP1/4E-BP1 (PubMed:29236692, PubMed:33157014). Références associées : PMID:29236692, PMID:33157014
• Rheb est nécessaire à la localisation lysosomale du complexe TSC-TBC ; en situation de privation, il est inactivé par TSC-TBC afin d’empêcher l’activation de mTORC1 (PubMed:24529379, PubMed:33157014). Références associées : PMID:24529379, PMID:33157014
• Il possède une faible activité GTPase intrinsèque (PubMed:15340059). Références associées : PMID:15340059
• Au niveau subcellulaire, Rheb se localise dans le système endomembranaire, notamment au niveau des membranes des lysosomes, de l’appareil de Golgi et du réticulum endoplasmique, ainsi que dans le cytosol.
• L’expression tissulaire est ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans les muscles squelettiques et cardiaques (PubMed:8543055).
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la prénylation (lipoprotéine), la méthylation, la phosphorylation et la formation de liaisons isopeptidiques (conjugaison Ubl).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• En Western blot, une bande d’environ 20 kDa est attendue ; il est recommandé d’utiliser des contrôles positifs issus de lysats cellulaires humains, murins ou de rat, notamment ceux présentant une forte expression de RheB (par exemple, les tissus musculaires).
• En immunocytochimie, validez les protocoles de fixation et de perméabilisation ; RheB se localise dans les structures endomembranaires, ce qui produit un marquage ponctiforme.
• Pour l’ELISA, des formats direct ou sandwich peuvent être envisagés ; la réactivité croisée avec la souris et le rat offre une flexibilité dans le développement de tests multi-espèces.
• En tant qu’anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être surveillée ; des étapes de pré-adsorption peuvent réduire les liaisons non spécifiques si nécessaire.

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