Anticorps monoclonal de lapin anti-RGAP1 (validé par KD) pour WB, IHC-P, ELISA - Q9H0H5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RGAP1

• RGAP1, également connu sous le nom de Rac GTPase-activating protein 1, MgcRacGAP ou CYK4, est un composant de 71 kDa du complexe centralspindline, un module de signalisation dépendant des microtubules et médié par Rho qui organise la formation de l’anneau contractile pendant la cytokinèse. Il se lie séquentiellement à ECT2 et RAB11FIP3 pour réguler l’ingression du sillon de clivage et l’abscission. Références associées : PMID:18511905
• Au-delà de son activité GAP, RGAP1 contrôle la croissance et la différenciation des cellules hématopoïétiques par des mécanismes indépendants de la régulation des Rac GTPases. Références associées : PMID:10979956
• RGAP1 joue un rôle essentiel dans l’érythropoïèse, et les mutations du gène RACGAP1 sont associées à l’anémie dysérythropoïétique congénitale de type IIIB (CDAN3B). Références associées : PMID:34818416
• RGAP1 se localise dynamiquement dans le noyau, le cytoplasme, le fuseau mitotique, le sillon de clivage, le corps médian, l’anneau du corps médian et la membrane cellulaire, ce qui reflète ses rôles multiples au cours de la division cellulaire.
• Il est fortement exprimé dans le testicule, le thymus et le placenta, avec des niveaux plus faibles dans la rate et les lymphocytes du sang périphérique. Dans le testicule, son expression est limitée aux cellules germinales et atteint un pic dans les spermatocytes. Son expression dépend du cycle cellulaire et culmine dans la phase G2/M.
• RGAP1 présente une forte activité GAP envers CDC42 et RAC1, et une activité plus faible envers RHOA. Il pourrait également participer au transport des sulfates dans les cellules germinales mâles, à la spermatogenèse et à la prolifération neuronale.
• La protéine contient un domaine doigt de zinc et un domaine en bobine superenroulée, et elle subit des réactions d’acétylation, de phosphorylation et d’ubiquitination, ce qui indique une régulation complexe.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’anticorps a été généré contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 533 à 632 ; cette région est probablement accessible dans les conformations natives et dénaturées, ce qui permet des applications comme le WB et l’IHC-P. Effectuez une validation dans votre système d’échantillon spécifique.
• Pour le Western blot, utilisez des lysats de lignées cellulaires avec une expression modérée à élevée de RGAP1 (par exemple HeLa, Jurkat) ou de tissu testiculaire. L’expression de RGAP1 atteint son maximum en phase G2/M ; une synchronisation peut améliorer l’intensité du signal.
• Pour l’IHC-P, vérifiez la coloration sur des coupes fixées au formol et incluses dans la paraffine de testicule, de thymus ou de placenta, où RGAP1 est abondamment exprimé. Les conditions de récupération d’antigène peuvent nécessiter une optimisation.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec la protéine RGAP1 de souris et de rat ; validez la réactivité spécifique à l’espèce avec des contrôles de tissu ou de cellules appropriés.
• Le test ELISA peut être réalisé en utilisant le peptide immunogène comme contrôle positif ; le titre de l’anticorps et l’affinité de liaison doivent être déterminés de manière empirique.

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