Anticorps polyclonal de lapin anti-RFC1 pour WB, IF/ICC et ELISA - P35251

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RFC1

• RFC1 code pour la grande sous-unité (140 kDa) du complexe hétéropentamère du facteur de réplication C (RFC), également appelé activateur 1.
• Le complexe RFC est nécessaire pour l'élongation des matrices d'ADN amorcées par les ADN polymérases delta et epsilon, et charge PCNA sur l'ADN d'une manière dépendante de l'ATP (PubMed:9488738).
  Références associées :
  PMID:9488738
• Cette sous-unité se lie spécifiquement à la jonction amorce-matrice et peut interagir à la fois avec l'ADN simple et double brin, ainsi qu'avec les séquences riches en GA, y compris l'élément de transcription PO-B, ce qui suggère un double rôle dans la régulation de la réplication et de la transcription de l'ADN.
• RFC1 est localisé dans le noyau et est largement exprimé dans tous les tissus humains à l'exception du placenta.
• La protéine est sujette à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'ubiquitination (liaison isopép-tidique), comme l'ont montré des études protéomiques à grande échelle.
• Les mutations de RFC1 sont associées au syndrome de l'ataxie cérébelleuse, de la neuropathie et de l'aréflexie vestibulaire (CANVAS), ce qui étend sa pertinence clinique au-delà du métabolisme central de l'ADN.
• L'épissage alternatif génère plusieurs variants de transcrits, contribuant à la diversité fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, attendez une bande autour de 128 kDa. Utilisez un SDS-PAGE à 6-8 % pour une séparation optimale des protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, incluez une coloration nucléaire de contraste (par exemple DAPI) et confirmez la localisation nucléaire. Les conditions de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation.
• ELISA : l'anticorps peut être utilisé pour détecter le RFC1 recombinant ou endogène ; titrez-le de manière appropriée.
• L'alignement de séquence de l'immunogène (aa 400-700) chez l'homme, la souris et le rat indique une conservation élevée, ce qui confirme la réactivité croisée rapportée ; cependant, validez-le dans votre dispositif expérimental spécifique.

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