Anticorps Monoclonal Lapin Anti-Rev-Erbα/NR1D1 pour WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P20393

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de Rev-Erbα/NR1D1

• Rev-Erbα (NR1D1) est un récepteur nucléaire liant l'hème qui agit comme un répresseur transcriptionnel, formant une branche négative critique de l'horloge circadienne en réprimant directement les gènes centraux de l'horloge, notamment BMAL1, CLOCK et CRY1.
• Il régule diverses voies métaboliques, y compris le métabolisme des lipides et des acides biliaires, l'adipogenèse, la gluconéogenèse et les réponses inflammatoires, de manière dépendante de l'hème en recrutant le complexe corépresseur NCOR1/HDAC3.
• La protéine se lie à l'ADN sous forme de monomère sur les éléments RevRE (consensus 5'-[A/G]GGTCA-3' avec une séquence 5' riche en A/T) ou sous forme d'homodimère sur les éléments RevDR-2 (répétitions directes espacées de deux nucléotides).
• Rev-Erbα entre en compétition avec RORα pour la liaison à l'ADN et réprime PPARGC1A, contrôlant ainsi la synthèse de l'hème et l'expression rythmique des enzymes métaboliques.
• Au niveau subcellulaire, NR1D1 est principalement nucléaire mais se localise également au cytoplasme et se trouve dans les épines dendritiques, ce qui est cohérent avec son rôle dans les fonctions neuronales.
• Large expression avec des niveaux élevés dans le foie, le tissu adipeux, le muscle squelettique, le cerveau et les macrophages ; l'expression oscille de manière diurne dans le noyau suprachiasmatique et les tissus périphériques.
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination, qui modulent sa stabilité et son activité ; la dégradation médiée par l'ubiquitine soulage la répression inflammatoire lors de déclencheurs.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 280–360 dans le domaine de liaison du ligand ; cette région peut conférer une spécificité pour la conformation du récepteur et les interactions dépendantes de l'hème.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est de 67 kDa ; vérifiez la taille de la bande dans les échantillons pertinents, car l'expression endogène peut varier en fonction de l'heure circadienne et du type de tissu.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), prévoyez un marquage principalement nucléaire ; cependant, une localisation cytoplasmique et dendritique peut être observée dans les cellules neuronales, il est donc nécessaire d'optimiser les conditions de fixation et de perméabilisation appropriées.
• Pour les applications ELISA, envisagez de coupler avec un système de détection reconnaissant la région Fc de l'IgG de lapin si vous utilisez cet anticorps primaire dans un format indirect.
• Lorsque vous travaillez avec Rev-Erbα, notez que son expression et son activité sont régulées de manière rythmique ; récoltez les échantillons à des points temporels circadiens cohérents pour assurer la reproductibilité.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la souris et le rat, il peut donc être utilisé pour des études comparatives entre espèces ; validez dans l'espèce souhaitée à l'aide de contrôles appropriés.

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