Anticorps polyclonal de lapin Anti-REST/NRSF pour IF/CCI, ELISA - Q13127

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de REST/NRSF

• REST/NRSF, également appelé facteur de transcription silencieux RE1 ou facteur silencieur neurorrestrictif, est un répresseur transcriptionnel qui se lie aux éléments silencieurs neurorrestrictifs (NRSE) pour éteindre l'expression des gènes neuronaux dans les cellules non neuronales. Il recrute les corépresseurs SIN3A et RCOR1, qui attirent à leur tour des histones désacétylases pour modifier la chromatine et maintenir la répression. Références associées : PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093
• REST recrute le complexe BHC pour la désacétylation et la déméthylation des histones, et peut former un complexe répresseur avec CDYL et l'histone méthyltransférase EHMT2, qui est impliqué dans la suppression de la transformation cellulaire. Références associées : PMID:19061646
• L'isoforme 3 (un variant d'épissage plus court) présente une activité répressive plus faible et peut former des hétérodimères avec la forme complète de REST, inhibant sa liaison à l'ADN et son recrutement de corépresseurs, ce qui déréprime les gènes cibles. Ce changement d'isoforme est crucial pour l'audition et l'activation des gènes neuronaux. Références associées : PMID:11779185, PMID:11741002
• REST maintient l'état quiescent des cellules souches neurales adultes en réprimant les gènes neuronaux ; sa dissociation des sites NRSE permet la différenciation en neurones matures. Références associées : PMID:21258371
• Au cours du développement postnatal, REST réprime l'expression de GRIN2B, favorisant un changement dans la composition des sous-unités des récepteurs NMDA synaptiques de GRIN2B vers GRIN2A (par similarité).
• En conditions hypoxiques, REST agit comme un répresseur clé en se liant directement aux sites RE1/NRSE des promoteurs des gènes sensibles à l'oxygène. Références associées : PMID:27531581
• REST peut conférer une résistance au stress dans le cerveau vieillissant en régulant les gènes impliqués dans la mort cellulaire et les réponses au stress. Références associées : PMID:24670762
• Dans le cancer du sein, REST régule négativement l'expression de SRRM3, et la perte de REST est corrélée à une augmentation de l'invasivité tumorale. Références associées : PMID:26053433
• Exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux plus élevés dans les tissus lymphoïdes ; dans les neurones du cortex préfrontal et de l'hippocampe, le REST nucléaire diminue dans la maladie d'Alzheimer, la démence frontotemporale et la maladie de Parkinson, et se délocalise souvent dans les corps de Lewy. Références associées : PMID:24670762, PMID:30684677, PMID:21258371, PMID:26053433, PMID:8568247
• REST se localise à la fois dans le noyau et le cytoplasme, contient neuf motifs doigt de zinc de type C2H2, et est régulé par phosphorylation et ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (résidus 760–1060) se situe dans la région C-terminale de REST de longueur complète (isoforme 1). Cet anticorps est censé reconnaître l'isoforme 1 ; l'isoforme 3 plus courte peut ne pas être détectée. Validez la réactivité dans votre système d'échantillon adapté.
• Pour IF/CCI, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation. La coloration nucléaire doit être majoritaire, mais un signal cytoplasmique peut être observé dans certaines conditions.
• Choisissez des modèles cellulaires appropriés : les lignées non neuronales (par ex. HEK293, HeLa) expriment REST, tandis que les neurones matures présentent typiquement une expression faible ou absente. Utilisez un knockdown par siRNA ou un blocage par peptide pour confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, la séquence de l'immunogène ou la protéine recombinante REST complète peut servir d'étalon ou de peptide de blocage. Envisagez à la fois les formats de dosage direct et indirect.
• En tant qu'anticorps polyclonal, vérifiez la cohérence d'un lot à l'autre lors du changement de batches pour des expériences critiques.

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