Anticorps monoclonal de lapin anti-REST/NRSF pour WB, IP, ELISA - Q13127

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de REST/NRSF

• REST/NRSF est un répresseur transcriptionnel à doigt de zinc qui se lie à l'élément silencieur restrictif aux neurones (NRSE) et réprime l'expression des gènes neuronaux dans les cellules non neuronales. Références associées : PMID:11741002 PMID:11779185 PMID:12399542
• Il recrute les corépresseurs SIN3A et RCOR1, qui à leur tour recrutent des histones désacétylases, et médie également la répression via le complexe BHC par désacétylation et déméthylation des histones, conduisant à la compaction de la chromatine. Références associées : PMID:10449787 PMID:10734093
• REST peut également réprimer la transcription en recrutant CDYL et l'histone méthyltransférase EHMT2, un processus potentiellement important pour la suppression de la transformation cellulaire. Références associées : PMID:19061646
• Dans les cellules souches neurales, REST maintient la répression des gènes neuronaux, préservant la quiescence et empêchant une différenciation prématurée. Références associées : PMID:21258371
• Sous conditions hypoxiques, REST agit comme un répresseur clé en se liant directement aux sites NRSE sur les promoteurs des gènes cibles ; il médie également la résistance au stress dans le cerveau vieillissant et contribue à la mort cellulaire neuronale induite par l'ischémie, en partie par la répression du miR-132. Références associées : PMID:27531581 PMID:24670762
• L'épissage alternatif produit des isoformes, y compris une isoforme courte qui peut s'hétérodimériser avec REST de pleine longueur et inhiber son activité répresseur ; l'épissage dépendant de SRRM4 génère une isoforme de REST essentielle pour l'audition. Références associées : PMID:11741002 PMID:11779185
• REST est principalement nucléaire mais peut également être détecté dans le cytoplasme ; c'est une phosphoprotéine, sujette à l'ubiquitination, et elle contient plusieurs domaines à doigt de zinc.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, avec des niveaux plus élevés dans les tissus lymphoïdes ; dans le cerveau, REST est exprimé dans des populations neuronales spécifiques et son épuisement nucléaire est lié à la maladie d'Alzheimer, à la maladie de Parkinson et à la démence à corps de Lewy, où il peut s'accumuler dans les corps de Lewy. Références associées : PMID:8568247 PMID:24670762 PMID:30684677 PMID:26053433

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 100–200 du REST/NRSF humain ; cette région peut être présente dans plusieurs isoformes. Pensez à réaliser un alignement de séquences pour évaluer la reconnaissance potentielle des isoformes.
• Pour le western blot (WB), attendez-vous à une bande autour de 122 kDa, cohérente avec le poids moléculaire prédit. Les modifications post-traductionnelles (par ex., phosphorylation, ubiquitination) peuvent entraîner de légers décalages de migration ou des bandes supplémentaires.
• REST est une protéine nucléaire ; des protocoles d'extraction nucléaire efficaces ou des lysats cellulaires totaux incluant les fractions nucléaires peuvent améliorer la détection en WB et IP.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), le format monoclonal de lapin offre généralement une haute spécificité et un faible bruit de fond ; incluez un contrôle isotype approprié.
• En ELISA, utilisez un test de compétition avec le peptide pour vérifier la liaison spécifique ; le peptide immunogène peut servir de contrôle positif.
• L'anticorps montre une réactivité croisée avec le REST de souris et de rat ; validez les conditions de test dans l'espèce ciblée, car la conservation de l'épitope peut influencer les performances.

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