Anticorps polyclonal de lapin anti-RBCK1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9BYM8

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RBCK1

• RBCK1 (protéine 1 contenant des doigts de zinc de type RanBP et C3HC4), également connue sous le nom de HOIL-1, RNF54 ou XAP4, est une ubiquitine ligase E3 qui adopte plusieurs isoformes par épissage alternatif.
• Fonctionne comme une ubiquitine-protéine ligase E3, acceptant l'ubiquitine de UBE2L3/UBCM4 et la transférant à des substrats tels que l'IREB2 oxydé, TAB2 et IRF3, favorisant ainsi la dégradation protéasomale. Références associées : PMID:12629548 PMID:17449468 PMID:18711448
• Composant du complexe LUBAC, qui conjugue des chaînes de polyubiquitine linéaires (liées en Met-1) aux substrats et est essentiel pour l'activation des voies de signalisation canoniques NF-κB et JNK. Références associées : PMID:17006537 PMID:19136968 PMID:21455173
• L'ubiquitination linéaire de IKBKG et RIPK1 médiée par LUBAC interfère avec la mort cellulaire induite par le TNF, empêchant ainsi une inflammation excessive. Références associées : PMID:17006537 PMID:21455173 PMID:21455180
• Dans l'immunité innée, le LUBAC décore les bactéries cytosoliques avec des chaînes d'ubiquitine linéaires, servant de signal « mange-moi » pour la xénophagie et favorisant l'activation de NF-κB. Références associées : PMID:28481331
• En collaboration avec OTULIN, le LUBAC régule la signalisation Wnt canonique pendant l'angiogenèse. Références associées : PMID:23708998
• La protéine contient des domaines en doigt de zinc de type RanBP et C3HC4 ainsi qu'une région enroulée (coiled-coil) ; elle subit une acétylation et une phosphorylation.
• Identifiée comme un facteur associé au VHB, RBCK1 interagit avec la protéine X du virus de l'hépatite B et pourrait participer aux interactions hôte-virus.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 60–192 de la RBCK1 humaine, une région conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à une bande proche de 58 kDa ; utilisez des lysats de contrôle positif provenant de cellules exprimant RBCK1 (par exemple, HeLa, HEK293T) et confirmez la spécificité avec des contrôles par knockdown.
• En immunofluorescence (IF/ICC), RBCK1 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau ; optimisez la fixation et la perméabilisation en fonction du type cellulaire utilisé.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser la protéine RBCK1 recombinante comme étalon de référence et validez les conditions de dosage avec des échantillons positifs et négatifs connus.

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