Anticorps polyclonal de lapin anti-RAPH1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q70E73

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RAPH1

• RAPH1 (protéine 1 contenant des domaines associés à Ras et d'homologie à la pleckstrine), également connue sous les noms de Lamellipodin, PREL-2 et ALS2CR18/ALS2CR9, contient des domaines PH et RA typiques des adaptateurs de signalisation qui relient les signaux membranaires au cytosquelette.
• Fonction principale : agit comme médiateur des signaux membranaires localisés, régulant de manière essentielle la dynamique des lamellipodes et régulant négativement l'adhésion cellulaire, influençant ainsi la motilité et la morphologie cellulaires.
• Famille de gènes et isoformes : codée par le gène RAPH1 ; l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, notamment RMO1 et RMO1-RAPH1, qui présentent des profils d'expression distincts selon les tissus.
• Localisation subcellulaire : présente au niveau de la membrane cellulaire et du cytosquelette, avec un enrichissement dans les lamellipodes et les filopodes, des protrusions dynamiques fondées sur l'actine, essentielles à la migration et à l'adhésion cellulaires.
• Distribution tissulaire : exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus ; l'isoforme RMO1-RAPH1 présente ses niveaux les plus élevés dans le cerveau, le cœur, les ovaires et l'embryon en développement, tandis que l'isoforme RMO1 est principalement abondante dans le foie et faiblement exprimée dans les lymphocytes B.
• Modifications post-traductionnelles : soumise à l'acétylation et à la phosphorylation ; classée comme une phosphoprotéine, sa structure tridimensionnelle ayant été déterminée expérimentalement, ce qui souligne son rôle dans la signalisation et le remodelage du cytosquelette.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'anticorps polyclonal a été produit contre une protéine de fusion recombinante couvrant la région N-terminale (aa 1-240) de RAPH1 humain ; il est recommandé de vérifier la spécificité de détection des isoformes à l'aide d'une extinction génique ou d'une analyse des transcrits spécifique des isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 135 kDa ; assurez une extraction adéquate des protéines à partir d'échantillons frais ou bien conservés et envisagez d'ajouter des inhibiteurs de phosphatases afin de préserver les états de phosphorylation.
• En immunofluorescence/immunocytométrie (IF/ICC), une perméabilisation est recommandée pour accéder aux pools associés à la membrane et au cytosquelette ; effectuez les contrôles appropriés afin de distinguer les signaux spécifiques des signaux non spécifiques.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; lors de l'utilisation de ces espèces, confirmez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène et optimisez les conditions pour chaque système modèle.

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