Anticorps polyclonal anti-Rap1B pour WB, IF/ICC, ELISA - P61224

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Rap1B

• Rap1B (protéine Rap-1b apparentée à Ras), également connue sous le nom de protéine liant le GTP smg p21B, appartient à la superfamille des petites GTPases de Ras.
• Codée chez l'humain par le gène RAP1B (ID du gène : 5908), la protéine existe sous plusieurs isoformes en raison de l'épissage alternatif.
• Rap1B possède une activité GTPase intrinsèque et fonctionne comme un commutateur moléculaire dans la transduction des signaux, alternant entre des états actifs liés au GTP et des états inactifs liés au GDP.
• Elle joue un rôle essentiel dans la polarité des cellules endothéliales et la formation de la lumière vasculaire en contribuant à l'activité de polarisation de KRIT1 et de CDH5.
• Elle est nécessaire à la localisation de PRKCZ, PARD3 et TIAM1 phosphorylés au niveau des jonctions cellulaires, établissant ainsi la fonction basale de barrière endothéliale.
• Au niveau subcellulaire, Rap1B se localise à la membrane cellulaire, dans le cytosol et au niveau des jonctions cellulaires.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la prénylation (modification lipidique), la phosphorylation et la méthylation, qui régulent son association à la membrane et son activité.
• Sur le plan clinique, les mutations de RAP1B sont associées à des variants pathologiques, ce qui souligne son importance pour la santé humaine.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, utilisez des lignées cellulaires humaines ou murines connues pour exprimer Rap1B (par exemple, des cellules endothéliales) comme témoins positifs ; une bande d'environ 21 kDa est attendue.
• En immunofluorescence/ICC, envisagez d'optimiser les conditions de fixation et de perméabilisation afin de préserver l'accessibilité de l'antigène, car Rap1B se localise à la membrane et aux jonctions cellulaires.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être testé contre la protéine Rap1B recombinante (telle que l'immunogène) afin de confirmer la liaison ; titrez l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• En raison de sa nature polyclonale, l'anticorps peut détecter plusieurs isoformes de Rap1B ou des membres apparentés de la famille Rap ; validez sa spécificité dans le système d'échantillons concerné.
• Une réactivité croisée est rapportée chez l'humain et la souris ; si vous utilisez des échantillons de rat, réalisez des expériences pilotes pour vérifier la réactivité.

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