Anticorps polyclonal de lapin anti-RANKL pour WB, IF/ICC, ELISA - O14788

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RANKL (TNFSF11)

• RANKL (Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand, activateur récepteur du ligand du facteur nucléaire kappa-B), également désigné TNFSF11, ODF, OPGL et TRANCE, est une protéine transmembranaire de type II appartenant à la superfamille des ligands du facteur de nécrose tumorale (TNF).
• En tant que cytokine, c'est un régulateur maître de la différenciation et de l'activation des ostéoclastes : il se lie à son récepteur RANK (TNFRSF11A) et au récepteur leurre OPG (TNFRSF11B), contrôlant ainsi le remodelage osseux.
• RANKL améliore la capacité des cellules dendritiques à stimuler la prolifération des lymphocytes T naïfs et est impliqué dans la régulation des interactions entre lymphocytes T et cellules dendritiques, suggérant un rôle dans l'immunité adaptative.
• Il favorise la résorption osseuse pathologique dans l'hypercalcémie humorale maligne, soulignant son importance dans les pathologies osseuses associées au cancer. Références associées : PMID:22664871
• RANKL déclenche l'ostéoclastogenèse via des cascades de signalisation qui génèrent des oscillations intracellulaires soutenues de Ca2+, conduisant à l'activation de NFATC1, à sa translocation nucléaire et à l'induction de la transcription de gènes spécifiques des ostéoclastes.
• La protéine se localise sur la membrane cellulaire et dans le cytoplasme ; elle peut également être sécrétée sous forme soluble (sRANKL) par épissage alternatif ou clivage protéolytique.
• L'expression la plus élevée est observée dans les ganglions lymphatiques périphériques, avec des niveaux modérés à bas dans la rate, les leucocytes sanguins périphériques, la moelle osseuse, le cœur, le placenta, le muscle squelettique, l'estomac et la thyroïde.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée ; la molécule existe à la fois sous des isoformes ancrées à la membrane et solubles, régulées par l'épissage alternatif et le clivage.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 78 à 317 du RANKL humain, incluant le domaine d'homologie extracellulaire TNF ; par conséquent, cet anticorps est susceptible de détecter à la fois les formes membranaire et soluble (sRANKL).
• Pour le Western blotting, envisagez d'utiliser des lysats de tissus à forte expression de RANKL tels que les ganglions lymphatiques ou les lymphocytes T activés, et réalisez la validation en conditions réductrices pour observer la bande d'environ 35 kDa.
• En immunofluorescence/immunocytochimie, une perméabilisation appropriée peut être nécessaire pour la détection cytoplasmique ; des études de colocalisation avec des marqueurs membranaires peuvent aider à confirmer la distribution subcellulaire.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut convenir comme réactif de capture ou de détection pour quantifier le sRANKL dans les surnageants de culture cellulaire ou les fluides biologiques ; réalisez systématiquement une validation croisée avec une courbe étalon caractérisée dans votre matrice spécifique.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est indiquée ; cependant, les dilutions de travail optimales et la validation spécifique à l'espèce doivent être réalisées empiriquement dans le système d'échantillon concerné.

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