Anticorps polyclonal de lapin anti-RALGPS1 pour WB et ELISA - Q5JS13

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RALGPS1

• Code un facteur d'échange de nucléotides guanyliques (GEF) qui active spécifiquement la petite GTPase RALA en catalysant l'échange GDP/GTP, régulant ainsi les cascades de signalisation en aval.
• Également connue sous les noms de RalGEF2 et RalGPS1A, la protéine contient un domaine PH et un motif de liaison à SH3, caractéristiques des membres de la famille RalGEF, qui facilitent le ciblage membranaire et les interactions protéine-protéine.
• Le gène RALGPS1 subit un épissage alternatif, produisant au moins deux isoformes principales présentant des profils de distribution tissulaire distincts.
• L'isoforme 1 est fortement exprimée dans le cœur et les testicules, avec des niveaux plus faibles dans le cerveau, le pancréas, les muscles squelettiques, l'intestin grêle et le thymus ; l'isoforme 2 est exprimée plus largement dans le cerveau, le côlon, les reins, le pancréas, la prostate, les muscles squelettiques, l'intestin grêle, les testicules, le thymus et l'utérus.
• Les études de localisation subcellulaire montrent que RALGPS1 est présente à la fois dans le cytoplasme et sur la membrane cellulaire, ce qui concorde avec son rôle dans la régulation spatiale de la signalisation de RALA.
• Serait potentiellement impliquée dans l'organisation du cytosquelette, ce qui suggère un rôle dans la forme cellulaire, la motilité ou le trafic intracellulaire (par similarité).
• Les études structurales (structure 3D) ont fourni des informations sur le mécanisme catalytique du domaine Sec7, soulignant son importance en tant que facteur de libération des nucléotides guanyliques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1–300 de RALGPS1 humaine (NP_055451.1), une région pouvant être conservée entre les isoformes ; par conséquent, l'anticorps peut détecter plusieurs variants d'épissage. Envisagez un blocage par peptide ou des contrôles spécifiques des isoformes afin de confirmer la spécificité.
• Pour le western blot, la RALGPS1 endogène migre à environ 62 kDa. Assurez une lyse cellulaire complète et envisagez des protocoles d'enrichissement en protéines membranaires, car la protéine est associée à la membrane plasmique.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, utilisez une courbe standard générée avec le fragment d'immunogène recombinant pour une estimation quantitative, et validez l'essai à l'aide de lysats de cellules ou de tissus humains.
• Compte tenu de sa large expression tissulaire, validez l'anticorps sur un panel de tissus humains (par exemple, cœur, testicules, cerveau) afin de confirmer le profil de bandes attendu.
• RALGPS1 étant un GEF, des expériences de co-immunoprécipitation peuvent être associées à un WB pour étudier son interaction avec RALA ; toutefois, une optimisation empirique des tampons de lyse est recommandée.

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