Anticorps monoclonal anti-RALBP1 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15311

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la RALBP1

• La RALBP1, également connue sous le nom de RLIP76 ou de protéine 1 interagissant avec Ral, est une protéine multifonctionnelle d'environ 76 kDa codée par le gène RALBP1 (GeneID : 10928).
• Elle agit comme un effecteur en aval de RALA et de RALB et fonctionne comme une protéine activatrice de la GTPase (GAP), inactivant CDC42 et RAC1 en stimulant leur activité GTPase intrinsèque. Références connexes : PMID:7673236
• Elle participe à la régulation, dépendante de la signalisation de Ral, de l'endocytose médiée par les récepteurs, notamment à l'internalisation dépendante des ligands des récepteurs de l'EGF et de l'insuline. Références connexes : PMID:10910768, PMID:12775724
• Au cours de la mitose, elle sert d'échafaudage pour la phosphorylation d'EPSIN/EPN1 médiée par le complexe cycline B-CDK1, inhibant ainsi l'endocytose ; elle facilite également la fission mitochondriale en servant d'échafaudage à la phosphorylation de DNM1L au niveau des mitochondries. Références connexes : PMID:12775724, PMID:21822277
• Elle possède une activité de transport dépendante de l'ATP pour les conjugués du glutathion et les xénobiotiques tels que la doxorubicine, ce qui pourrait contribuer à la résistance multidrogue des cellules cancéreuses.
• Elle se localise au niveau de plusieurs compartiments subcellulaires, notamment la membrane cellulaire, le cytosol, le cytosquelette (pôle du fuseau), le noyau et les mitochondries.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire à de faibles niveaux, avec une expression particulièrement forte dans les érythrocytes.
• Elle est modifiée post-traductionnellement par acétylation et phosphorylation ; elle est classée parmi les protéines associées à des termes tels que liaison à l'ATP, activation de la GTPase et translocase.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 200 à 300 ; il convient de tenir compte du fait que l'épitope peut être partiellement enfoui dans la conformation native, ce qui peut nécessiter une dénaturation ou une récupération antigénique appropriée pour l'immunohistochimie.
• Pour l'IHC-P, une récupération épitopique standard induite par la chaleur (par exemple, avec un tampon citrate à pH 6,0) et une concentration optimisée de l'anticorps primaire sont recommandées ; valider l'utilisation dans les espèces dont la réactivité croisée est confirmée (humaine, souris, rat).
• En IF/ICC, la perméabilisation avec 0,1 à 0,3 % de Triton X-100 peut améliorer l'accessibilité des antigènes nucléaires ou mitochondriaux ; inclure des contrôles négatifs appropriés.
• Les applications ELISA bénéficient d'un titrage de l'anticorps contre le peptide immunogène ou la protéine RALBP1 recombinante afin d'établir la concentration optimale de revêtement et la plage de détection.

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