Anticorps polyclonal anti-RAG2 de lapin pour WB, ELISA - P55895

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine 2 activatrice de la recombination V(D)J

• La protéine 2 activatrice de la recombination V(D)J (RAG2) est une composante centrale du complexe RAG, essentielle pour l'assemblage des gènes diversifiés des immunoglobulines et des récepteurs des cellules T lors du développement lymphocytaire.
• RAG2 est requise pour toutes les activités catalytiques de RAG1, médiant le clivage de l'ADN via l'entaillage et la formation d'épingle à cheveu pour générer des extrémités codantes et des extrémités signaux.
• RAG2 agit comme un capteur de l'état de la chromatine, se liant à l'histone H3 triméthylée sur la Lys4 (H3K4me3) pour stimuler à la fois les étapes d'entaillage et de formation d'épingle à cheveu.
• Le complexe RAG contribue à l'exclusion allélique des pré-cellules B en induisant un repositionnement dépendant de l'ATM de l'allèle non recombiné vers l'hétérochromatine péricentromérique.
• RAG2 se localise dans le noyau et son expression est restreinte aux lignées cellulaires des lymphocytes B et T.
• Les mots-clés UniProt mettent en lumière ses rôles dans la régulation de la chromatine, la recombination de l'ADN et son association avec des maladies comme l'immunodéficience combinée sévère (SCID).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 258-527, une région incluant le domaine PHD C-terminal critique pour la reconnaissance de H3K4me3 ; cela peut produire des anticorps détectant les isoformes pleine longueur et certaines isoformes tronquées.
• Pour le western blot (WB), envisagez d'optimiser la dilution (généralement 1:500–1:2000 pour les anticorps polyclonaux) et incluez des lysats cellulaires appropriés de lignées lymphocytaires comme contrôles positifs.
• Dans les applications ELISA, utilisez la protéine ou le peptide RAG2 recombinant comme antigène de revêtement ; la réactivité croisée avec la RAG2 de souris permet la validation dans les systèmes murins.
• En raison de sa nature polyclonale, confirmez la cohérence d'un lot à l'autre et validez dans le système d'échantillon spécifique (par exemple, lymphocytes primaires, thymocytes) pour garantir les performances attendues.

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