Anticorps monoclonal de lapin anti-Raf1 pour WB, ELISA - P04049

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Raf1

• RAF1 code pour la serine/thréonine-protéine kinase Raf1 (c-RAF ou Raf-1), un maillon régulateur essentiel entre les GTPases Ras associées à la membrane et la cascade MAPK/ERK, qui contrôle les décisions de destin cellulaire comme la prolifération, la différenciation, l'apoptose, la survie et la transformation oncogénique.
• Après activation, Raf1 initie la cascade MAPK en phosphorylant séquentiellement les kinases MAP2K à double spécificité (MEK1/MEK2), puis les kinases régulées par signaux extracellulaires (ERK1/ERK2).
• Au-delà de la voie MAPK canonique, Raf1 phosphoryle de nombreux autres substrats, notamment BAD (qui favorise la survie cellulaire), les adénylyl cyclases (ADCY2/5/6), PPP1R12A et la troponine T cardiaque (TNNT2), modulant ainsi l'apoptose, la signalisation AMPc et la contraction musculaire.
• Raf1 exerce des effets anti-apoptotiques en se translocalisant vers la mitochondrie, où il se lie à BCL2 et déplace BAD pro-apoptotique, protégeant directement les cellules de la mort.
• La kinase régule la signalisation Rho et la migration cellulaire, contribue à la cicatrisation des plaies et induit la transformation oncogénique des cellules épithéliales en réprimant l'occludine (OCLN), une protéine des jonctions serrées, via le répresseur transcriptionnel SNAI2/SLUG.
• Au niveau subcellulaire, Raf1 se localise dynamiquement entre le cytoplasme, la membrane cellulaire, la mitochondrie et le noyau, ce qui est cohérent avec ses divers rôles dans la signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (acides aminés 1–100), ce qui suggère que cet anticorps monoclonal peut reconnaître un épitope au sein du domaine régulateur ; vérifiez la réactivité dans votre espèce cible et votre type d'échantillon.
• Pour le western blotting (WB), Raf1 est détecté à environ 73 kDa ; envisagez d'utiliser des lignées cellulaires avec une expression connue de Raf1 (par ex. HeLa, Jurkat) comme contrôles positifs.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat implique une conservation de l'épitope, mais nous recommandons de valider la détection chez ces espèces dans vos conditions expérimentales spécifiques.
• Cet anticorps est validé pour WB et ELISA ; d'autres applications (par ex. IHC, CCI, IP) n'ont pas été testées et nécessitent une optimisation et une vérification par l'utilisateur final.

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