Anticorps monoclonal de lapin anti-Rad51 pour WB, ELISA, ChIP - Q06609

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de l’homologue 1 de la protéine RAD51 de réparation de l’ADN (RAD51)

• RAD51 catalyse l’échange homologue de brins d’ADN, une étape centrale de la réparation de l’ADN par recombinaison homologue (RH), en formant des filaments nucléoprotéiques dépendants de l’ATP sur l’ADN simple brin (ADNs). Références associées : PMID:12205100, PMID:12442171, PMID:15937124, PMID:17515904
• Elle reconnaît l’homologie entre des partenaires d’ADN homologues et catalyse l’échange de brins pour former des molécules jointes, reliant les cassures d’ADN traitées aux matrices de réparation. Références associées : PMID:12205100, PMID:18417535, PMID:19303847
• RAD51 est recrutée au niveau des fourches de réplication bloquées afin de résoudre le stress réplicatif et participe à la réparation des pontages interbrins.
Références associées : PMID:27797818, PMID:31844045, PMID:26253028
• Dans des conditions de stress oxydatif, RAD51 coopère avec RAD51C et XRCC3 pour réguler le nombre de copies de l’ADN mitochondrial. Références associées : PMID:20413593
• Au cours de la méiose, RAD51 agit comme facteur accessoire non catalytique de la recombinase DMC1, facilitant l’appariement des chromosomes et le crossing-over.
• RAD51 se localise de manière dynamique dans le noyau, les chromosomes, le cytoplasme, la région périnucléaire, la matrice mitochondriale et le centrosome, reflétant ses multiples rôles dans le métabolisme de l’ADN.
• RAD51 est fortement exprimée dans les testicules et le thymus, avec une expression modérée dans l’intestin grêle, le placenta, le côlon, le pancréas et l’ovaire, et une faible expression dans le sein. Références associées : PMID:18417535
• RAD51 subit des modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la conjugaison de type ubiquitine, qui régulent son activité et ses interactions protéiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique couvrant la région N-terminale (aa 1-100) de la protéine RAD51 humaine ; cet épitope est conservé chez la souris et le rat, ce qui peut expliquer la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot (WB), utiliser des conditions réductrices et dénaturantes ; s’attendre à une bande autour de 37 kDa. Optimiser la dilution de l’anticorps et les conditions de détection en fonction du type d’échantillon spécifique.
• Pour l’ELISA, envisager une association avec un anticorps de détection dirigé contre un épitope non chevauchant ; valider avec de la RAD51 recombinante ou des lysats cellulaires.
• Dans les essais ChIP, utiliser une réticulation appropriée (par exemple, au formaldéhyde) et optimiser la sonication ; l’enrichissement en RAD51 peut être induit par des agents endommageant l’ADN (par exemple, l’étoposide).
• Il a été rapporté que cet anticorps réagit avec des échantillons humains, murins et de rat ; pour les autres espèces, vérifier l’homologie de séquence de la région immunogène avant utilisation.

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