Anticorps polyclonal de lapin anti-Rad50 pour WB, IHC-P, IP, ELISA - Q92878

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RAD50

• RAD50 est un composant central du complexe MRN (MRE11-RAD50-NBS1) et joue un rôle central dans la réparation des cassures double brin de l'ADN, la recombination homologue, l'intégrité des télomères et la méiose.
  Références associées : PMID:15064416, PMID:21757780, PMID:27889449
• Le complexe MRN médie la résection des extrémités de l'ADN, générant de l'ADN simple brin critique pour la recombination homologue, et facilite le recrutement des facteurs de réparation et l'activation des kinases ATM/ATR après un dommage à l'ADN.
  Références associées : PMID:15064416, PMID:27889449, PMID:28867292, PMID:15790808, PMID:16622404
• Le complexe possède des activités endonucléase simple brin et exonucléase 3′-5′ double brin (fournies par MRE11), tandis que RAD50 lie et attache les extrémités de l'ADN pour réguler l'activité de MRE11.
  Références associées : PMID:11741547, PMID:9590181, PMID:9651580, PMID:12805565, PMID:28134932
• RAD50 contient des domaines de liaison à l'ATP ; la liaison à l'ATP induit une conformation fermée qui positionne de manière optimale les extrémités de l'ADN au sein du site actif de MRE11 (par similarité).
• RAD50 est principalement nucléaire, se localisant aux télomères chromosomiques et aux sites de dommages à l'ADN ; il participe également au traitement des R-loops et module la formation des t-loops.
  Références associées : PMID:10888888, PMID:31537797
• RAD50 est exprimé à de faibles niveaux dans la plupart des tissus, avec une expression élevée dans les testicules et les fibroblastes.
• RAD50 est sujet à l'acétylation et à la phosphorylation, et est caractérisé par des motifs de liaison à l'ATP, en coiled-coil, de liaison au zinc et d'hydrolase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'analyse par Western blot, attendez-vous à un bande proche de 154 kDa. Utilisez un lysat témoin positif approprié provenant de cellules humaines, murines ou de rat et incluez un contrôle de chargement.
• Pour l'IHC-P sur coupes incluses en paraffine, des méthodes standard de récupération antigénique (par exemple, récupération induite par la chaleur) peuvent être envisagées ; des expériences pilotes sont recommandées.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), utilisez des protocoles standard avec des étapes de pré-nettoyage ; l'anticorps est adapté pour précipiter les complexes RAD50 endogènes à partir d'extraits nucléaires.
• Pour l'ELISA, l'immunogène peptidique (résidus N-terminaux 1-100) peut être utilisé pour valider le titre de l'anticorps ; la réactivité croisée avec des protéines étroitement apparentées doit être exclue par alignement de séquences.
• En raison de sa réactivité inter-espèces, cet anticorps peut être utilisé pour des études comparatives dans des modèles de réparation de l'ADN humains, murins et de rat.

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