Anticorps monoclonal lapin anti-RAD50 pour WB, ELISA - Q92878

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RAD50

• RAD50 (protéine de réparation de l'ADN RAD50), également appelé NBSLD ou hRad50, est un composant central du complexe MRN (MRE11-RAD50-NBN) qui orchestre les réponses cellulaires aux cassures double-brin de l'ADN.
• Le complexe MRN est essentiel pour la réparation des cassures double-brin par recombinaison homologue, où il médie la résection des extrémités de l'ADN pour générer l'ADN simple brin nécessaire à l'invasion du brin.
  Références associées :
  PMID:15064416
  PMID:21757780
  PMID:27889449
• RAD50 lie et retient les extrémités d'ADN, et son changement de structure dépendant de l'ATP contrôle l'activité nucléase de MRE11, positionnant les substrats d'ADN pour le clivage.
  Références associées :
  PMID:11741547
  PMID:12805565
  PMID:28134932
• Au-delà de la résection des extrémités, le complexe MRN active les kinases ATM et ATR pour transduire les signaux de dommages à l'ADN, une fonction indépendante de l'activité nucléase de MRE11.
  Références associées :
  PMID:15064416
  PMID:15790808
  PMID:16622404
• Au niveau des télomères, le complexe MRN module la formation de la boucle T, contribuant à l'intégrité des télomères et à la régulation de leur longueur.
  Références associées :
  PMID:10888888
• RAD50 est également impliqué dans le traitement des R-loops, résolvant les conflits transcription-réplication pour maintenir la stabilité génomique.
  Références associées :
  PMID:31537797
• Au niveau sous-cellulaire, RAD50 se localise principalement dans le noyau, où il s'associe à la chromatine et aux télomères.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité et ses interactions en réponse aux dommages à l'ADN.
• L'expression tissulaire est généralement faible, avec un enrichissement notable dans les testicules et des niveaux détectables dans les fibroblastes.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à un peptide C-terminal (aa 1200-1300) en dehors des domaines conservés d'ATPase et de bobine superenroulée ; il est recommandé de vérifier la spécificité par des contrôles de knockdown ou de knockout dans les types d'échantillons concernés.
• Pour le Western blot, RAD50 migre à environ 154 kDa ; utilisez un pourcentage de gel adapté (par exemple, gel de séparation à 6 %) et assurez un transfert efficace de cette grande protéine (par exemple, des temps de transfert humide prolongés).
• L'anticorps est décrit comme réagissant avec le RAD50 humain, de souris et de rat ; la réactivité croisée avec la protéine endogène de ces espèces doit être validée dans vos conditions expérimentales.
• Pour les applications ELISA, les conditions de revêtement optimales et les plages de détection doivent être déterminées empiriquement en utilisant l'immunogène peptidique ou la protéine recombinante pleine longueur comme étalon.

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