Anticorps polyclonal anti-Rad50 pour WB, IHC-P, ELISA - Q92878

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Rad50

• RAD50 est un composant du complexe MRN (avec MRE11 et NBN), qui joue un rôle central dans la réparation des cassures double-brin (DSB), la recombinaison de l'ADN et le maintien de l'intégrité des télomères (PubMed:15064416, PubMed:21757780, PubMed:27889449). Références associées : PMID:15064416 PMID:21757780 PMID:27889449
• Le complexe MRN est essentiel pour la réparation des cassures double-brin de l'ADN via la recombinaison homologue (HR), un mécanisme sans erreur qui se produit principalement pendant les phases S et G2 (PubMed:15064416, PubMed:21757780). Références associées : PMID:15064416 PMID:21757780
• RAD50 contribue à la résection des extrémités de l'ADN en se liant aux extrémités et en régulant les activités exonucléase/endonucléase de MRE11 ; la liaison à l'ATP induit un changement conformationnel qui contrôle l'accessibilité de la nucléase MRE11 (PubMed:11741547, PubMed:12805565, PubMed:28134932). Références associées : PMID:11741547 PMID:12805565 PMID:28134932
• Le complexe MRN médie également la signalisation des dommages à l'ADN en activant les kinases ATM et ATR, une fonction indépendante de l'activité nucléase de MRE11 (PubMed:15064416, PubMed:15790808, PubMed:16622404). Références associées : PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:16622404
• RAD50 se localise dans le noyau et se trouve au niveau des télomères des chromosomes où il peut moduler la formation de boucles en t (t-loops) (PubMed:10888888). Références associées : PMID:10888888
• L'expression de RAD50 est très faible dans la plupart des tissus, avec des niveaux plus élevés observés dans les testicules et les fibroblastes.
• RAD50 est soumis à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et la phosphorylation, et possède des domaines de liaison à l'ATP, en coiled-coil et de liaison au zinc (mots-clés UniProt).
• Le complexe MRN traite également les R-loops, contribuant à la stabilité génomique (PubMed:31537797). Références associées : PMID:31537797

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-270) de la protéine humaine RAD50 ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître l'extrémité N-terminale de la protéine.
• Pour le western blot (WB), RAD50 migre à ~154 kDa ; assurez des conditions de séparation SDS-PAGE et de transfert appropriées (par ex., temps de transfert prolongés) pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), validez la coloration sur des échantillons de testicule humain ou de fibroblastes, qui présentent une expression plus élevée de RAD50 ; envisagez une optimisation de la récupération antigénique.
• Pour l'ELISA, l'immunogène peptidique synthétique peut servir de contrôle positif pour confirmer la réactivité de l'anticorps ; la performance sur la protéine endogène de pleine longueur doit être validée indépendamment.
• Étant donné le rôle central de RAD50 dans la réparation de l'ADN et la biologie des télomères, cet anticorps peut être utile pour des expériences d'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) ou des tests de foyers de dommages à l'ADN, bien que de telles applications n'aient pas été validées avec ce produit et nécessitent une optimisation par l'utilisateur.

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