Anticorps monoclonal anti-Rad23A pour WB, IF/ICC, ELISA - P54725

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de Rad23A

• RAD23A, également connue sous le nom de protéine homologue A de RAD23 impliquée dans la réparation par excision des UV (HR23A/hHR23A), est une protéine multifonctionnelle qui participe à la déméthylation de l’histone H4K20, à la réparation de l’ADN, à la dégradation des protéines dépendante de l’ubiquitine, à la régulation transcriptionnelle et à la réplication virale. Références associées : PMID:12643283 PMID:14621999 PMID:15321727
• Elle déméthyle spécifiquement les formes mono-, di- et triméthylées de la « Lys-20 » de l’histone H4 (H4K20me1, H4K20me2, H4K20me3) en formes non méthylées, ce qui active la transcription des gènes codants et des éléments répétitifs. Référence associée : PMID:32209475
• RAD23A est essentielle à la réparation par excision de nucléotides (NER) : elle forme un complexe avec XPC qui présente une activité NER in vitro, et elle stabilise XPC. Référence associée : PMID:9372924
• Elle facilite la dégradation des protéines dépendante de l’ubiquitine en se liant aux chaînes de polyubiquitine liées à la « Lys-48 » et en acheminant les substrats ubiquitinés vers le protéasome 26S. Références associées : PMID:12643283 PMID:14621999 PMID:15321727
• RAD23A joue un rôle dans la réplication du VIH-1 : elle est nécessaire à l’association de Vpr du VIH-1 avec le protéasome de l’hôte dans les cellules non proliférantes et les macrophages primaires.
• Localisation subcellulaire : principalement nucléaire.
• La protéine subit un épissage alternatif et une phosphorylation, et contient des domaines de type ubiquitine (Ubl).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à une région interne (aa 200–300) de RAD23A humaine. L’anticorps peut détecter la RAD23A de pleine longueur et potentiellement les isoformes contenant cette région. Validez la spécificité dans le système d’échantillon pertinent.
• Pour le Western blot, une bande autour de 40 kDa est attendue. Optimisez les contrôles de charge et la dilution de l’anticorps en fonction de votre lysat spécifique.
• En immunofluorescence/ICC, prévoyez un marquage nucléaire cohérent avec la localisation de RAD23A. Utilisez des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés.
• Pour l’ELISA, envisagez les conditions de revêtement avec le peptide synthétique ou la protéine recombinante afin d’évaluer la liaison. Réalisez des tests de réactivité croisée en cas d’utilisation sur des espèces autres qu’humaine ou murine.

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