Anticorps monoclonal anti-Rad18 pour WB et ELISA - Q9NS91

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Rad18

• RAD18 (également appelé RNF73, hHR18, hRAD18) est une E3 ubiquitine-protéine ligase appartenant à la famille des protéines à doigt de zinc RING. Elle contient un domaine doigt de zinc de type RING, essentiel à son activité ubiquitine transférase.
• RAD18 joue un rôle essentiel dans la réparation post-réplication de l'ADN endommagé par les UV, en médiant le comblement des lacunes sur le brin fils lors de la réplication de l'ADN endommagé.
• Elle forme un complexe avec l'enzyme E2 de conjugaison de l'ubiquitine UBE2B pour catalyser la mono-ubiquitination de l'antigène nucléaire de prolifération cellulaire (PCNA) associé à l'ADN sur le résidu Lys-164.
• RAD18 possède une activité de liaison à l'ADN simple brin (ssADN), qui pourrait faciliter son recrutement sur les sites de dommages à l'ADN.
• Au niveau subcellulaire, RAD18 est principalement localisée dans le noyau, mais on peut également la trouver dans le cytoplasme et au niveau du centrosome, au sein du centre organisateur des microtubules.
• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, et elle forme des liaisons isopeptidiques dans le cadre de son mécanisme d'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène de cet anticorps est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 100 de la RAD18 humaine (Q9NS91), qui comprend la région N-terminale. Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 56 kDa est attendue ; nous vous recommandons d'utiliser des contrôles de charge appropriés et de valider la détection dans votre matrice d'échantillon spécifique.
• Compte tenu de sa réactivité avec l'homme, la souris et le rat, cet anticorps peut convenir à des études interspécifiques, mais nous recommandons de vérifier sa spécificité pour l'espèce étudiée à l'aide de contrôles positifs et négatifs.
• Pour les applications ELISA, le peptide immunogène peut servir d'antigène de revêtement pour le développement du test ; optimisez la concentration de revêtement et la dilution de l'anticorps pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.
• Aucune recommandation de dilution expérimentale n'est fournie ; les chercheurs doivent titrer l'anticorps en fonction de leurs conditions de test spécifiques.

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