Anticorps polyclonaux Anti-Rac GTPase-activating protein 1 (RGAP1) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9H0H5

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du RGAP1

• La Rac GTPase-activating protein 1 (RGAP1), également connue sous le nom de MgcRacGAP ou CYK4, est un composant central du complexe centralspindlin essentiel pour la cytokinèse. Elle médie la signalisation dépendante des microtubules et pilotée par Rho qui conduit à la formation de l'anneau contractile de myosine et à la division cellulaire ultérieure. Références connexes : PMID:18511905
• Le RGAP1 interagit séquentiellement avec ECT2 et RAB11FIP3 pour coordonner l'invagination du sillon de clivage et l'abscission, assurant une attache correcte du corps intermédiaire à la membrane cellulaire lors des dernières étapes de la cytokinèse. Références connexes : PMID:18511905
• Au-delà de son rôle dans la division cellulaire, le RGAP1 régule la croissance et la différenciation des cellules hématopoïétiques et joue un rôle critique dans l'érythropoïèse. Références connexes : PMID:10979956, PMID:34818416
• La protéine présente une forte activité GTPase-activating vers CDC42 et RAC1, avec une activité plus faible vers RHOA, soulignant sa fonction régulatrice dans les réseaux de signalisation des GTPases de la famille Rho.
• Le RGAP1 se localise dynamiquement dans plusieurs compartiments sous-cellulaires, notamment le noyau, le cytoplasme, le fuseau, le sillon de clivage, le corps intermédiaire et la membrane cellulaire, reflétant ses rôles multiples tout au long du cycle cellulaire.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le testicule, le thymus et le placenta, avec une régulation dépendante du cycle cellulaire culminant en phase G2/M ; il contribue également à la spermatogenèse et au transport des sulfates dans les cellules germinales mâles.
• La protéine contient des domaines à doigts de zinc, des régions enroulées en hélice (coiled-coil) et des motifs de liaison aux lipides, et subit une phosphorylation et une acétylation, comme l'indiquent les données structurelles et de modifications post-traductionnelles.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les résidus 353 à 632 du RGAP1 humain, une région qui peut englober des domaines fonctionnels ; envisagez de vérifier la couverture de tout variant d'épissage ou isoforme connu dans votre configuration expérimentale.
• Dans un Western blot, une bande prédominante proche de 71 kDa est attendue dans les échantillons humains, de souris et de rat. Validez la spécificité à l'aide de témoins positifs/négatifs appropriés, tels que des lysats de knockout ou des modèles de surexpression.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des étapes de récupération d'antigène peuvent être nécessaires ; optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour le tissu cible afin d'obtenir une coloration robuste.
• L'immunofluorescence (IF/ICC) peut révéler la localisation du RGAP1 au niveau du fuseau, du corps intermédiaire et du sillon de clivage dans les cellules en division ; effectuez un marquage double avec des marqueurs du cytosquelette (par exemple, α-tubuline) pour confirmer les structures mitotiques.
• La détection par ELISA peut convenir pour quantifier le RGAP1 dans des lysats cellulaires ou des préparations de protéines recombinantes. Incluez des courbes standard et des témoins blancs pour assurer la linéarité et la spécificité du dosage.

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