Anticorps Polyclonal Anti-RABGAP1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9Y3P9

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RABGAP1

• RABGAP1, également connu sous le nom de protéine activatrice des GTPases Rab 1, GAPCenA (protéine associée au GAP et au centrosome) ou TBC1D11, agit comme une protéine activatrice des GTPases (GAP) pour RAB6A, favorisant l'hydrolyse du GTP pour réguler le trafic et la signalisation médiés par Rab.
• Il joue un rôle dans la nucléation des microtubules au centrosome et est impliqué dans la transition métaphase-anaphase lors de la division cellulaire, reliant le trafic membranaire au contrôle du cycle cellulaire.
• RABGAP1 contient un domaine TBC (Tre-2/Bub2/Cdc16) caractéristique des RabGAP, ainsi que des régions en hélice alpha qui pourraient faciliter les interactions protéine-protéine et le ciblage centrosomal.
• La localisation est principalement cytoplasmique, avec une enrichissement au niveau du centrosome et dans le cytosol, comme l'indiquent les études de fractionnement subcellulaire et d'immunofluorescence.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes, et est régulée par phosphorylation, comme en témoignent les données de protéomique et la présence de sites de phosphorylation dans les bases de données.
• Le poids moléculaire est d'environ 122 kDa (calculé ~121,7 kDa) ; l'anticorps reconnaît une bande proche de cette taille en western blotting de lysats appropriés.
• RABGAP1 a été identifié dans des criblages protéomiques à haut débit, confirmant son expression dans les tissus humains et son association avec le protéome centrosomal.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène a été conçu contre une région C-terminale (aa 830-1069) de RABGAP1 humain, qui couvre une partie du domaine en hélice alpha et peut inclure des régions critiques pour l'activité GAP ; ainsi, l'anticorps peut reconnaître des épitopes fonctionnels.
• Pour le western blotting, utilisez des conditions réductrices standard et chargez 20 à 50 µg de lysat cellulaire total ; la bande prédite est à 122 kDa, et la réactivité croisée souris permet l'analyse dans des lignées cellulaires courantes telles que NIH/3T3 ou MEF.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération de l'antigène utilisant un tampon citrate ou EDTA est recommandée ; optimisez la dilution de l'anticorps (par exemple, 1:50–1:200) et incluez des témoins négatiques appropriés pour confirmer la spécificité.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection ; des titrations en damier préliminaires sont conseillées pour déterminer les concentrations optimales d'enrobage et d'anticorps.
• Comme RABGAP1 est une protéine peu abondante impliquée dans la régulation du cycle cellulaire, envisagez de synchroniser les cellules pour enrichir les cellules en métaphase si vous évaluez la localisation centrosomale ou les changements d'expression dépendants du cycle cellulaire.

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