Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-RAB8A pour WB, IF/ICC, ELISA - P61006

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RAB8A

• RAB8A est une petite GTPase qui alterne entre des conformations inactives liées au GDP et actives liées au GTP, fonctionnant comme un régulateur majeur du trafic membranaire intracellulaire, du transport vésiculaire polarisé et de la libération de neurotransmetteurs.
• Favorise la transcytose de PODXL vers les sites d'initiation de la membrane apicale (AMIS), conduisant la formation de la surface apicale et la lumenogenèse en concert avec RAB11A, le complexe exocyst et les protéines de polarité. Références associées : PMID:20890297
• Contrôle la morphologie compacte de l'appareil de Golgi, influençant ainsi l'organisation du Golgi et le traitement du cargo. Références associées : PMID:26209634
• Collabore avec MYO5B et RAB11A pour établir la polarisation des cellules épithéliales, essentielle pour l'architecture et la fonction tissulaires. Références associées : PMID:21282656
• Participe au trafic membranaire vers le cil primaire et est requis pour la ciliogenèse, avec des implications pour la signalisation et le développement. Références associées : PMID:21844891 PMID:30398148 PMID:20631154
• Joue un rôle dans l'autophagie, contribuant à la séquestration et à la dégradation des composants cytoplasmiques. Références associées : PMID:27103069
• Lors d'un stress lysosomal, RAB8A est recruté et stabilisé via une phosphorylation médiée par LRRK2, supprimant l'élargissement lysosomal induit par le stress via les effecteurs EHBP1/EHNP1L1. Références associées : PMID:30209220
• Présente une large localisation subcellulaire incluant la membrane plasmique, le Golgi, les endosomes, les endosomes de recyclage, le cilium, les phagosomes, le centrosome, le corps médian et les lysosomes, reflétant ses fonctions de trafic polyvalentes.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 140–207 de RAB8A humain (NP_005361.2), une région susceptible de générer des anticorps reconnaissant à la fois la forme pleine longueur et possiblement les variants d'épissage ; vérifier la spécificité en utilisant des contrôles pertinents (par exemple, lysats avec knockdown par siRNA ou knockout).
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 24 kDa est attendue sur la base du poids moléculaire calculé ; utiliser un gel SDS-PAGE à un pourcentage approprié pour les protéines de faible poids moléculaire et envisager une surexpression ou un enrichissement pour les signaux endogènes faibles.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), prévoir des motifs de coloration cohérents avec la localisation multifacette de RAB8A (vésicules cytoplasmiques, Golgi, membrane plasmique, cils) ; valider la colocalisation avec des marqueurs d'organites.
• Pour l'ELISA, assurer un revêtement approprié de l'immunogène recombinant ou de la protéine native provenant de lysats cellulaires/tissulaires et effectuer une titration pour optimiser le rapport signal/bruit.
• La réactivité croisée avec RAB8A de souris et de rat est spécifiée ; cependant, la conservation de l'épitope doit être confirmée si vous travaillez avec d'autres espèces ou des membres proches de la famille RAB (par exemple, RAB10, RAB13).

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