Anticorps polyclonal de lapin anti-RAB5B pour WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P61020

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RAB5B

• Le gène RAB5B code pour la protéine Rab-5B liée à Ras, un membre de la famille Rab des petites GTPases qui agissent comme régulateurs principaux du trafic membranaire intracellulaire.
• La protéine fonctionne comme un interrupteur moléculaire en alternant entre un état inactif lié au GDP et un état actif lié au GTP, recrutant ainsi des protéines effectrices spécifiques pour médier la formation, le mouvement, l'ancrage et la fusion des vésicules.
  Références associées :
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• RAB5B joue un rôle critique dans le trafic endocytique précoce : il est nécessaire pour le recrutement de l'antigène 1 des endosomes précoces (EEA1) sur les endosomes naissants, une étape clé de la maturation des endosomes.
  Références associées :
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• Il est essentiel pour l'endocytose et le trafic correct du facteur de croissance épidermique (EGF) et de la transferrine à travers le compartiment endosomal précoce.
  Références associées :
  PMID:16086013 | PMID:17562788
• Au niveau sous-cellulaire, RAB5B se localise principalement sur la face cytoplasmique des membranes des endosomes précoces, mais on le trouve également sur la membrane cellulaire et dans les mélanosomes.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation et la prénylation, qui modulent son activité, son ancrage membranaire et ses interactions avec les protéines régulatrices.
• L'épissage alternatif du gène RAB5B produit plusieurs isoformes, et la protéine est classée comme glycoprotéine et lipoprotéine d'après son traitement post-traductionnel.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 100–200 de la protéine RAB5B humaine (NP_002859.1). Cette région est conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité multi-espèces observée. Les utilisateurs doivent valider les performances dans leurs propres systèmes d'échantillons.
• Pour le Western blot, une bande spécifique d'environ 24 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; il est recommandé d'inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple des lignées cellulaires avec une expression connue de RAB5B) pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et immunofluorescence sur paraffine (IF-P), RAB5B présente un motif ponctué caractéristique des endosomes précoces. Il est recommandé d'effectuer une co-coloration avec un anticorps anti-EEA1 ou d'autres marqueurs endosomaux pour vérifier la localisation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; cependant, les dilutions optimales et l'appariement avec d'autres anticorps doivent être déterminés de manière empirique.

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