Anticorps monoclonal de lapin anti-RAB45 pour WB et ELISA - Q8IZ41

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine contenant les domaines Ras et EF-hand

• RASEF (RAB45) code pour une GTPase Rab appartenant à la superfamille RAS, caractérisée par une combinaison unique de domaines Ras et EF-hand, et subit un épissage alternatif pour générer plusieurs isoformes.
• La fonction principale de RASEF est d'agir comme une protéine adaptatrice de la dynéine, activant le transport médié par la dynéine et la motilité dynéine-dynactine sur les microtubules de manière indépendante du Ca(2+). Références connexes : PMID:30814157
• RASEF régule également la formation et le tri des granules de zymogène et la sécrétion d'enzymes digestives par les cellules acineuses pancréatiques, contribuant à la fonction pancréatique exocrine.
• Au niveau subcellulaire, RASEF se localise dans le cytoplasme périnucléaire, l'appareil de Golgi, les endosomes précoces et tardifs, et les lysosomes, indiquant des rôles dans le trafic intracellulaire des vésicules.
• La protéine contient des motifs EF-hand liant le calcium et des domaines de liaison au GTP, et est régulée par la liaison des nucléotides et la phosphorylation, comme l'indiquent ses mots-clés.
• L'analyse de la spécificité tissulaire montre que RASEF est sous-exprimée dans les cellules de mélanome cutané, suggérant un rôle potentiel dans la biologie des mélanocytes ou la suppression tumorale.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est constitué des 120 acides aminés N-terminaux (correspondant au domaine de type Ras), ce qui peut permettre la reconnaissance d'épitopes conservés entre les espèces humaine et murine en raison d'une forte homologie de séquence.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 83 kDa ; envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires humaines ou murines (par exemple, HeLa, NIH/3T3) ou de tissu pancréatique, et validez avec des contrôles de charge appropriés.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour capturer ou détecter la protéine RAB45 recombinante ou endogène ; envisagez d'optimiser les conditions de revêtement et de vérifier la spécificité à l'aide d'étalons de protéine recombinante.
• Comme une réactivité croisée est rapportée pour l'humain et la souris, cet anticorps peut faciliter les études translationnelles ; néanmoins, confirmez toujours la réactivité dans le système d'échantillon pertinent avant les dosages quantitatifs.
• Étant donné la fonction d'adaptateur de la dynéine de cette protéine, les chercheurs pourraient explorer son utilité dans des expériences de co-immunoprécipitation ou de ligation de proximité pour étudier les interactions protéiques, bien que ces applications n'aient pas été validées pour ce produit.

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