Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-RAB31 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13636

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de RAB31

• RAB31 code pour la protéine Ras apparentée Rab-31 (également connue sous le nom de Rab-22B), une petite GTPase appartenant à la famille des Rab, régulateurs clés du trafic membranaire intracellulaire. Références associées : PMID:11784320
• RAB31 alterne entre une forme inactive liée au GDP et une forme active liée au GTP, recrutant des effecteurs en aval qui entraînent la formation, le transport, l'amarrage et la fusion des vésicules.
• Elle est nécessaire à l'intégrité structurelle et au fonctionnement normal de l'appareil de Golgi et du réseau trans-Golgien (TGN), et participe à la translocation stimulée par l'insuline de GLUT4 vers la membrane plasmique.
• RAB31 assure le trafic du récepteur du mannose-6-phosphate (M6PR) du TGN vers les endosomes, et favorise l'internalisation du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) dans les endosomes.
• Dans les cellules immunitaires, RAB31 contribue à la maturation du phagosome contre les agents pathogènes engloutis tels que Staphylococcus aureus et Mycobacterium tuberculosis.
• La localisation subcellulaire comprend l'appareil de Golgi, la membrane du réseau trans-Golgien, les endosomes précoces et les membranes du phagosome, reflétant son comportement dynamique de recyclage membranaire.
• L'expression la plus élevée est observée dans le placenta et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le cœur et les poumons ; elle est indétectable dans le foie, le muscle squelettique, les reins et le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et la prénylation (lipoprotéine) qui régulent probablement l'association membranaire ; la protéine est identifiée dans des jeux de données de protéomique.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène couvre la protéine recombinante pleine longueur (aa 1–195), qui peut reconnaître à la fois les conformations liées au GDP et au GTP ; vérifiez la spécificité de liaison dans différentes conditions de nucléotides si nécessaire.
• Pour le Western blot (WB), envisagez de charger des témoins positifs appropriés à partir de lysats de tissus/cellules humains, murins ou de rat connus pour exprimer RAB31 (par exemple, cerveau, placenta). Une bande proche de 22 kDa est attendue.
• En immunofluorescence/ICC (IF/ICC), comme RAB31 se localise dans des compartiments membranaires dynamiques, utilisez une fixation douce (par exemple, PFA 4%) et une co-marquage avec des marqueurs d'organites (TGN, endosomes précoces) pour confirmer la spécificité du signal.
• Pour l'ELISA, titrez à la fois l'anticorps et l'antigène pour déterminer les concentrations de travail optimales ; utilisez une protéine ou un peptide RAB31 recombinant comme antigène de revêtement.
• Comme l'anticorps est polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être validée dans le système d'échantillon pertinent.

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