Anticorps polyclonal de lapin anti-RAB14 pour WB et ELISA - P61106

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de RAB14

• RAB14 est un membre de la famille Rab des petites GTPases, qui agissent comme régulateurs clés du trafic membranaire intracellulaire, de la formation des vésicules à la fusion membranaire.
• La protéine cycle entre une forme inactive liée au GDP et une forme active liée au GTP, qui recrute les effecteurs en aval essentiels à la formation, au déplacement, à l'ancrage et à la fusion des vésicules.
• RAB14 est impliqué dans le trafic membranaire entre l'appareil de Golgi et les endosomes au cours du développement embryonnaire précoce.
• Il régule le transport Golgi-endosome des vésicules contenant le FGFR, une voie essentielle pour le dépôt de la membrane basale et la différenciation des lignages épiblaste/endoderme primitif.
• Avec son facteur d'échange de nucléotides guaniques DENND6A, RAB14 contrôle le transport endocytique d'ADAM10, le clivage de la N-cadhérine/CDH2 et l'adhésion cellulaire.
  Références associées : PMID:22595670
• RAB14 médie l'ancrage et la fusion endosomaux par interaction avec RUFY1 et RAB4B.
  Références associées : PMID:20534812
• Une interaction avec RAB11FIP1 suggère un rôle possible dans la formation des neurites.
  Références associées : PMID:26032412
• RAB14 se localise sur les endosomes de recyclage, les membranes des endosomes précoces, l'appareil de Golgi, le réseau trans-Golgien, les vésicules cytoplasmiques et les phagosomes. Il subit des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la méthylation et la prénylation.

Conseils expérimentaux et techniques

• La séquence de l'immunogène (acides aminés 39 – 140 de RAB14 humain) se situe dans une région conservée chez la souris, ce qui explique probablement la réactivité croisée observée. Lors de la conception de vos expériences, vérifiez l'alignement de séquence pour toute espèce non listée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 24 kDa, mais des modifications post-traductionnelles ou des complexes protéiques peuvent décaler la migration apparente. Incluez des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules humaines ou murines) et envisagez l'utilisation de conditions réductrices/dénaturantes.
• En ELISA, la nature polyclonale peut offrir une sensibilité élevée. Optimisez l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps ; l'utilisation de l'anticorps comme réactif de capture associé à un autre anticorps de détection peut réduire le bruit de fond.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variation d'un lot à l'autre. Pour les essais critiques ou quantitatifs, il est recommandé de tester plusieurs lots et d'établir des procédures opérationnelles standard.
• Assurez une préparation adéquate des échantillons et des étapes de blocage pour minimiser la liaison non spécifique, en particulier lorsque vous travaillez avec des matrices biologiques complexes.

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