Anticorps monoclonal de lapin anti-Rab12 [Validé KO] pour WB et ELISA - Q6IQ22

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Rab12

• RAB12 est un membre de la superfamille des petites GTPases de type Ras, agissant comme un interrupteur moléculaire qui alterne entre des conformations inactives liées au GDP et actives liées au GTP pour réguler le trafic membranaire intracellulaire.
• Il joue un rôle dans le transport des protéines des endosomes de recyclage vers les lysosomes, facilitant la dégradation de cargaisons comme le récepteur de la transferrine.
• RAB12 participe à l'autophagie, se localisant sur les membranes autophagosomales et influençant les processus autophagiques.
• Au niveau subcellulaire, RAB12 se trouve sur les membranes des endosomes de recyclage, des lysosomes, de l'appareil de Golgi et des vésicules autophagiques.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles clés, notamment une prénylation pour l'ancrage membranaire, ainsi que des phosphorylations et des acétylations.
• En tant que GTPase, RAB12 lie les nucléotides guanine et les ions magnésium, essentiels à son activité enzymatique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la protéine Rab12 humaine pleine longueur (aa 1-244), suggérant que l'anticorps peut reconnaître la Rab12 native dans les applications Western blot et ELISA ; validez en utilisant des contrôles positifs et négatifs appropriés dans votre système d'échantillons spécifique.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires humaines et murines (par exemple, HeLa, NIH/3T3) et un contrôle de knockout pour confirmer la spécificité, étant donné la mention [Validé KO].
• En ELISA, titrez l'anticorps contre la protéine Rab12 recombinante pour déterminer les concentrations de travail optimales, et incluez une courbe standard pour une analyse semi-quantitative.
• En raison de la bivalence de l'anticorps, la performance en ELISA direct peut nécessiter un pré-revêtement avec l'antigène recombinant ; envisagez de tester des formats indirects pour une meilleure sensibilité.
• Rab12 a un poids moléculaire prédit de 27 kDa ; confirmez la migration de la bande au poids attendu dans des conditions réductrices, et tenez compte des modifications post-traductionnelles possibles pouvant causer des décalages mineurs.

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