Anticorps polyclonal anti-RAB11B pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15907

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de RAB11B

• La protéine apparentée à Ras Rab-11B (RAB11B), également appelée protéine de liaison au GTP YPT3, est un membre de la superfamille Ras des petites GTPases. Elle alterne entre un état inactif lié au GDP et un état actif lié au GTP, fonctionnant comme un commutateur moléculaire dans le trafic membranaire intracellulaire.
  Références associées : PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B est un régulateur clé du recyclage endocytaire. Elle contrôle le recyclage apical de protéines transmembranaires telles que CFTR, ENaC, les canaux potassiques et les canaux calciques de type L voltage-dépendants. Elle régule également les voies de sécrétion constitutive et régulée, notamment l’exocytose des granules d’insuline.
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• La protéine est essentielle au transport et à la libération des mélanosomes par les mélanocytes, et elle module le transport intracellulaire de la V-ATPase en réponse à l’acidose extracellulaire.
  Références associées : PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B favorise la ciliogenèse en formant un complexe de ciblage ciliaire avec Rabin8/RAB3IP, ASAP1, RAB11FIP3 et ARF4, facilitant le trafic vésiculaire préciliaire vers le centriole mère. À l’inverse, la phosphorylation de WDR44 médiée par la signalisation de LPAR1 perturbe ce complexe et inhibe la croissance des cils.
  Références associées : PMID:25673879, PMID:31204173

• En outre, RAB11B interagit avec RABL3 pour favoriser la formation de vésicules ciliaires, ce qui souligne ses rôles multiples dans l’assemblage du cil primaire.
  Références associées : PMID:36052645

• Au niveau subcellulaire, RAB11B est principalement associée aux membranes des endosomes de recyclage, mais elle se trouve également sur les vésicules cytoplasmiques, les vésicules de sécrétion, les membranes des vésicules synaptiques et les membranes des phagosomes, ce qui reflète ses fonctions dynamiques dans le trafic intracellulaire.

• Les modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la citrullination, la méthylation et la prénylation, régulent son activité, sa localisation et ses interactions protéiques. L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes, et des mutations sont associées à une déficience intellectuelle.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100 à 200 de la protéine RAB11B humaine. Cette région est probablement conservée entre les espèces, ce qui concorde avec la réactivité croisée rapportée chez la souris et le rat. Cette conception fondée sur un peptide peut permettre de reconnaître les conformations dénaturées et natives de la protéine.
• En Western blot, une bande d’environ 24 kDa est attendue. Étant donné que RAB11B subit une prénylation et d’autres modifications, de légers décalages de taille ou des bandes supplémentaires peuvent être observés dans certains échantillons ; validez les résultats à l’aide de témoins positifs tels que des lysats cellulaires HeLa ou HEK293.
• En immunofluorescence/immunocytrochimie, une perméabilisation est généralement nécessaire pour les cibles intracellulaires. Des profils de marquage endosomal et vésiculaire sont attendus, avec un enrichissement possible au niveau des endosomes de recyclage.
• Pour les applications ELISA, le peptide immunogène peut servir d’antigène de revêtement, mais une optimisation minutieuse de la dilution de l’anticorps et des conditions de blocage est recommandée.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée à l’aide d’un témoin positif standardisé. Envisagez une validation dans le système d’échantillons pertinent (humain, souris ou rat) afin de confirmer les performances.

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