Anticorps polyclonal anti-QPCT pour WB, IF/ICC, ELISA - Q16769

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de QPCT

• Identité protéique : QPCT (glutaminyl-peptide cyclotransférase), également appelée glutaminyl cyclase (QC, sQC) et glutamyl cyclase, est une transférase sécrétée codée par le gène QPCT. Elle appartient à la famille des acyltransférases et contient un site actif de liaison au zinc.
• Fonction enzymatique principale : Elle catalyse la formation de résidus pyroglutamyliques N-terminaux à partir de précurseurs glutaminyle ou glutamyle, une modification essentielle pour la bioactivité et la stabilité de nombreux peptides et protéines.
• Spécificité de substrat : Elle présente une aversion pour les résidus acides et le tryptophane immédiatement adjacents au glutaminyle N-terminal, mais montre peu de dépendance vis-à-vis de la longueur de la chaîne peptidique au-delà du deuxième résidu.
• Transformation du peptide bêta-amyloïde : In vitro, elle convertit les peptides bêta-amyloïde tronqués au niveau de l'extrémité N-terminale (par exemple, [Glu-3]-bêta-amyloïde) en formes modifiées par le pyroglutamate, qui sont plus enclins à l'agrégation et neurotoxiques.
• Implication dans les maladies : Elle est impliquée dans la maladie d'Alzheimer via la production de peptides pyroglutamate-bêta-amyloïde présents dans les plaques séniles ; elle pourrait également participer à d'autres pathologies liées à l'amyloïde.
• Localisation sous-cellulaire : Elle est sécrétée dans l'espace extracellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle de modification de substrats extracellulaires tels que les hormones, les chimiokines et les peptides amyloïdes.
• Caractéristiques structurelles : Elle contient des ponts disulfures, des sites de N-glycosylation et un peptide signal ; le poids moléculaire prédit de la protéine mature est d'environ 40,9 kDa (observé autour de 41 kDa).
• Épissage alternatif : Le gène QPCT subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes ; l'immunogène (pleine longueur, acides aminés 1-361) cible toutes les isoformes connues contenant cette région.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène correspond à la protéine QPCT humaine entière (aa 1-361), ce qui offre une couverture épitopique étendue et permet de reconnaître à la fois les formes précurseurs et matures. La nature polyclonale améliore la sensibilité de détection sur toutes les variants d'épissage.
• Pour le Western blot, une bande spécifique est attendue autour de 41 kDa en conditions réductrices. Puisque la QPCT est sécrétée, il peut être préférable d'analyser le sérum, le plasma ou les surnageants de culture cellulaire plutôt que des lysats cellulaires totaux, selon le contexte expérimental.
• Pour l'IF/ICC, les protocoles de fixation et perméabilisation doivent être optimisés pour visualiser la QPCT dans les compartiments de la voie de sécrétion ; le marquage extracellulaire peut nécessiter des conditions non perméabilisantes. La co-localisation avec des marqueurs de l'appareil de Golgi ou des vésicules peut être évaluée.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser l'anticorps dans un format sandwich avec un anticorps de capture distinct ; cet anticorps peut servir de réactif de détection. La QPCT est présente sous forme soluble dans les fluides biologiques, ce qui la rend adaptée aux dosages quantitatifs.
• La réactivité croisée avec la QPCT de souris et de rat permet l'évaluation dans des modèles rongeurs de neurodégénérescence. Cependant, l'identité de séquence en acides aminés n'est pas de 100 %, la sensibilité doit donc être validée pour l'espèce et le système tissulaire concerné.

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