Ac anti-Pyruvate Carboxylase (PC) de lapin mAb pour WB et ELISA - P11498

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Pyruvate Carboxylase

• Le Pyruvate carboxylase (PC) est une enzyme mitochondriale qui catalyse la carboxylation dépendante de l'ATP du pyruvate en oxaloacétate, jouant un rôle clé dans la gluconéogenèse et la biosynthèse des lipides.
• L'enzyme subit une réaction en deux étapes : premièrement, la carboxylation de la biotine par hydrolyse de l'ATP ; deuxièmement, le transfert du groupe carboxyle au pyruvate.
• Expression spécifique aux tissus : dans le foie et le rein, le PC initie la synthèse du glucose ; dans le tissu adipeux, le foie et le cerveau, il contribue à la synthèse des lipides.
• Codé par le gène PC, la protéine humaine est une carboxylase dépendante de la biotine et un membre de la famille des enzymes multifonctionnelles.
• Localisé dans la matrice mitochondriale, le PC contient un peptide de signal pour l'importation mitochondriale.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, et la protéine est associée à des variants pathologiques.
• Contient des sites de liaison pour l'ATP, la biotine et le manganèse, essentiels pour son activité catalytique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-100) du PC humain ; cette région est conservée chez la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 130 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser un gel réducteur et des contrôles de charge appropriés en raison du poids moléculaire élevé.
• Dans ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour des formats directs ou de capture-détection ; validez avec du PC recombinant ou des lysats tissulaires où le PC est fortement exprimé (par exemple, des échantillons de foie ou de rein).
• Puisque le PC est une protéine mitochondriale, la préparation des échantillons peut nécessiter des protocoles d'enrichissement mitochondrial pour une détection optimale.
• En raison de la présence de biotine dans la cible, évitez les réagents de blocage contenant de la biotine si vous utilisez des systèmes de détection basés sur la biotine pour réduire le bruit de fond.

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