Anticorps monoclonal de lapin anti-PYCR1 pour WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P32322

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PYCR1

• PYCR1 code la pyrroline-5-carboxylate réductase 1, une enzyme mitochondriale qui catalyse la dernière étape de la biosynthèse de la proline, en réduisant la pyrroline-5-carboxylate en L-proline avec le NAD(P)H comme cofacteur. Références associées : PMID:16730026, PMID:19648921, PMID:23024808
• À des concentrations physiologiques, PYCR1 présente une activité spécifique plus élevée avec le NADH qu’avec le NADPH, reliant ainsi le métabolisme de la proline à l’équilibre rédox cellulaire. Références associées : PMID:16730026, PMID:23024808
• L’enzyme joue un rôle dans la réponse cellulaire au stress oxydatif, contribuant au maintien de l’homéostasie rédox. Références associées : PMID:16730026, PMID:19648921
• PYCR1 se localise dans la mitochondrie, ce qui est cohérent avec sa fonction dans le métabolisme des acides aminés et la production d’énergie.
• Les études protéomiques indiquent que PYCR1 subit des modifications post-traductionnelles telles que l’acétylation et la phosphorylation, susceptibles de réguler son activité.
• L’épissage alternatif du gène PYCR1 génère plusieurs variants de transcrits, ce qui pourrait élargir son répertoire fonctionnel.
• La protéine est annotée avec le mot-clé « variant pathologique » dans UniProt, ce qui suggère son implication dans des pathologies humaines.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène utilisé pour générer cet anticorps monoclonal correspond à la région centrale (aa 211-310) de PYCR1 humain, ce qui peut contribuer à la reconnaissance de la protéine endogène dans plusieurs immunoessais.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 33 kDa est attendue ; il convient d’utiliser des contrôles de chargement appropriés et des tampons de lyse adaptés aux protéines mitochondriales.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC, IF-P) et l’immunohistochimie (IHC-P), les conditions de fixation et de perméabilisation peuvent nécessiter une optimisation afin de détecter PYCR1 localisée dans les mitochondries. Une récupération antigénique peut être utile pour les tissus inclus en paraffine.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter l’utilisation conjointe d’un anticorps de détection PYCR1 approprié ; les informations sur le clone et l’épitope peuvent guider ce développement.
• Valider l’anticorps sur des lignées cellulaires humaines ou des échantillons de tissus pertinents connus pour exprimer PYCR1, notamment ceux présentant une synthèse active de proline ou soumis à un stress oxydatif.

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