Anticorps polyclonal de lapin anti-PXDN pour WB et ELISA - Q92626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'homologue peroxidasine (PXDN)

• L'homologue peroxidasine (PXDN) est une peroxydase sécrétée contenant de l'hème, appartenant à la famille des peroxydases. Il est également connu comme antigène associé au mélanome MG50, peroxydase vasculaire 1 et protéine du gène sensible à p53 2.
• La PXDN catalyse l'oxydation à deux électrons du bromure par le peroxyde d'hydrogène pour générer de l'hypobromite, qui médie la formation de liaisons croisées sulfilimine entre les résidus méthionine et hydroxylysine dans les hexamères NC1 du collagène IV, étape essentielle à l'assemblage du réseau de collagène IV. Références associées : PMID:18929642, PMID:19590037, PMID:22842973
• Ces liaisons croisées sulfilimine sont essentielles à l'assemblage dépendant du collagène IV de la fibronectine et de la laminine, ainsi qu'à la signalisation complète médiée par la matrice extracellulaire (MEC), incluant la prolifération cellulaire induite par les facteurs de croissance et la survie des cellules endothéliales, contribuant ainsi à l'intégrité de la membrane basale. Références associées : PMID:19590037, PMID:32543734, PMID:34679700
• La PXDN peut également promouvoir la tubulogenèse et l'angiogenèse via les voies ERK1/2, Akt et FAK. Références associées : PMID:25713063
• De plus, la PXDN bromine la chaîne Tyr-1485 du collagène IV alpha2, ce qui entraîne un enrichissement en brome des membranes basales. In vitro, elle peut oxyder le thiocyanate et l'iodure, qui peuvent entrer en compétition avec le bromure et inhiber la formation de liaisons sulfilimine. Références associées : PMID:32571911, PMID:28154175
• La PXDN est exprimée dans de multiples tissus, avec des niveaux plus élevés dans le cœur, le poumon, l'ovaire, la rate, l'intestin et le placenta, et des niveaux plus faibles dans le foie, le côlon, le pancréas, le rein, le thymus, le muscle squelettique et la prostate. Elle est également exprimée dans diverses tumeurs, notamment le mélanome, le cancer du sein, le cancer de l'ovaire et le glioblastome.
• Au niveau subcellulaire, la PXDN se localise dans le réticulum endoplasmique et est sécrétée dans l'espace extracellulaire, où elle s'intègre dans la matrice extracellulaire et la membrane basale.
• La protéine contient des répétitions riches en leucine, des domaines immunoglobulines et un domaine peroxydase ; elle se lie à l'hème, au calcium et aux laminines. Des variants pathogènes et un épissage alternatif impliquent la PXDN dans des processus développementaux et pathologiques. Références associées : PMID:32485152

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1320–1479 proches de l'extrémité C-terminale de la PXDN humaine ; cette région permet la détection de la forme pleine longueur et de certaines formes traitées. Il est recommandé de valider la détection de votre isoforme cible dans vos systèmes d'échantillons pertinents.
• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est d'environ 165 kDa ; l'utilisation d'un gel d'acrylamide à faible pourcentage et de temps de transfert prolongés permet d'améliorer la résolution et l'efficacité du transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la PXDN de souris, ce qui permet potentiellement des études sur des modèles murins. Cependant, confirmez la réactivité dans votre dispositif expérimental.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps contre l'immunogène ou la protéine native pour établir les concentrations de travail optimales ; les anticorps polyclonaux peuvent nécessiter une optimisation du blocage pour minimiser le bruit de fond.

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