Anticorps polyclonal de lapin anti-Pumilio 1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q14671

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Pumilio 1

• La protéine Pumilio homolog 1 (PUM1) est une protéine de liaison à l'ARN spécifique de séquence qui agit comme répresseur post-transcriptionnel en se liant à la région 3'-UTR des ARNm cibles via la séquence consensus de l'élément de réponse Pumilio (PRE) 5'-UGUANAUA-3'. Références associées : PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425

• PUM1 exerce sa répression par deux mécanismes : le recrutement direct du complexe déadénylasique CCR4-POP2-NOT conduisant à l'inhibition de la traduction et à la dégradation des ARNm, et la promotion de l'accessibilité des miARN pour une répression indépendante de la déadénylation. Références associées : PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814

• Après stimulation par le facteur de croissance, PUM1 est phosphorylée et se lie à la région 3'-UTR de l'ARNm CDKN1B/p27, induisant un changement conformationnel qui expose les sites de liaison aux miARN pour miR-221 et miR-222, entraînant une suppression efficace de CDKN1B/p27 et une entrée rapide dans le cycle cellulaire. Références associées : PMID:20818387

• PUM1 réprime un programme de gènes essentiels à la stabilité génomique, notamment les facteurs mitotiques, de réparation de l'ADN et de réplication de l'ADN ; cette activité est antagonisée par le lncRNA NORAD, qui séquestre PUM1 dans le cytoplasme. Références associées : PMID:26724866

• Dans les neurones, PUM1 régule les niveaux d'ARNm d'ATXN1 en se liant à sa région 3'-UTR et en régulant à la baisse les transcrits indépendamment de la machinerie des miARN, ce qui a des implications pour l'ataxie spinocérébelleuse. Références associées : PMID:25768905, PMID:29474920

• PUM1 se localise dans le cytoplasme, les corps P et les granules cytoplasmiques, et est exprimée de manière généralisée dans les tissus, notamment le cerveau, le cœur, les reins, les muscles, l'intestin et l'estomac, mais est absente de régions cérébrales spécifiques comme le cervelet, le corps calleux et l'hippocampe.

• PUM1 joue un rôle dans la détection cytoplasmique des virus, la spermatogenèse et le renouvellement des cellules souches embryonnaires en ciblant les ARNm pour la régulation post-transcriptionnelle, et est associée à des variants pathologiques liés à l'épilepsie, la déficience intellectuelle et la neurodégénérescence. Références associées : PMID:25340845

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1-130 de la Pumilio 1 humaine, ciblant la région N-terminale. Cette région est probablement conservée entre les espèces, ce qui explique la réactivité croisée observée avec la souris.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 126 kDa. Utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert adaptés aux protéines de haut poids moléculaire, et envisagez de prolonger les étapes de blocage et de lavage pour réduire le bruit de fond.
• En immunofluorescence/ICC, la localisation cytoplasmique et granulaire de PUM1 doit être évaluée avec une fixation et une perméabilisation adaptées ; validez le profil de coloration par rapport à des marqueurs connus de corps P ou de granules de stress si nécessaire.
• Pour les applications ELISA, l'immunogène de protéine recombinante peut servir de contrôle positif. Réalisez un titrage de l'anticorps pour optimiser le rapport signal sur bruit.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut se produire ; nous recommandons de valider chaque nouveau lot dans votre système d'essai spécifique.

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