Anticorps polyclonal de lapin anti-PUF60 pour WB, IP, ELISA - Q9UHX1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PUF60

• PUF60 (facteur d'épissage liant le poly(U) de 60 kDa), aussi appelé FIR, RoBPI ou Siah-BP1, est une protéine de liaison à l'ADN et à l'ARN impliquée dans l'épissage des pré-ARNm, l'apoptose et la régulation transcriptionnelle.
• Elle agit comme répresseur transcriptionnel via le complexe core-TFIIH, diminuant l'activité hélicase de ERCC3 et réprime la transcription de MYC induite par FUBP1 au niveau du promoteur P2.
• Dans l'épissage des pré-ARNm, PUF60 favorise l'épissage des introns avec des sites de branchement 3' faibles et se lie aux régions du tractus pyrimidinique et du site d'épissage 3' en coopération avec U2AF2.
• L'isoforme 6, exprimée dans le cancer colorectal mais pas dans l'épithélium normal, ne peut pas réprimer la transcription de MYC et inhibe l'apoptose induite par FIR, contribuant potentiellement à la progression tumorale.
• PUF60 se localise dans le noyau et est largement exprimée dans tous les tissus, notamment le cœur, le cerveau, les poumons, le foie, les reins et le côlon.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation et la phosphorylation, et est une cible connue de l'ubiquitination (conjugaison Ubl).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un fragment recombinant couvrant les acides aminés 243 à 542 de la PUF60 humaine (NP_055096.2), qui se situe dans la région C-terminale contenant les motifs de reconnaissance de l'ARN ; cette conception peut améliorer la spécificité.
• Pour le Western blot, utilisez un tampon de transfert standard et optimisez la dilution de l'anticorps primaire sur une gamme (par exemple 1:500–1:2000) en fonction du niveau d'expression endogène dans votre échantillon.
• En immunoprécipitation, l'anticorps peut capturer la PUF60 endogène à partir de lysats cellulaires humains, murins ou de rat ; validez par co-immunobuvardage avec un anticorps anti-PUF60 provenant d'un hôte différent.
• Pour l'ELISA, la nature polyclonale peut fournir une amplification du signal robuste ; associez-la à un anticorps de détection monoclonal adapté pour les applications en sandwich.
• Incluez toujours des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, lysat cellulaire total de HeLa pour WB) pour confirmer la performance de l'anticorps.

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